在進行原代肝細胞培養時,選擇合適的培養條件非常重要,以下是一些選擇培養條件的建議:1.培養基:選擇適合肝細胞生長的培養基,如William'sE培養基、RPMI1640培養基等。不同的培養基成分可能會影響肝細胞的生長和功能。2.溫度和濕度:肝細胞的培養溫度通常為37°C,濕度為95%左右。在培養過程中,需要保持培養箱內的溫度和濕度穩定。3.氧氣含量:肝細胞需要充足的氧氣供應,因此需要選擇透氣性好的培養容器,并保持培養箱內的氧氣含量充足。4.細胞密度:肝細胞的培養密度需要根據實驗目的和培養條件來確定。一般來說,肝細胞的培養密度不宜過高,以免影響細胞的生長和功能。5.細胞因子:在培養過程中,可以添加一些細胞因子,如胰島素、表皮生長因子等,以促進肝細胞的生長和功能。6.培養時間:肝細胞的培養時間需要根據實驗目的和培養條件來確定。一般來說,肝細胞的培養時間不宜過長,以免影響細胞的生長和功能。總之,選擇合適的培養條件需要考慮多方面的因素,包括培養基、溫度、濕度、氧氣含量、細胞密度、細胞因子和培養時間等。在選擇培養條件時,需要根據實驗目的和培養條件來確定,以確保肝細胞的生長和功能。 原代肝細胞衍生的Organoid既能提供需要的擁肝毒模型,也能體現肝細胞在應對病原體時的生理反應。北京牛原代肝細胞圖片
原代肝細胞也可以用于Organ-on-a-chip的構建。Organ-on-a-chip是一項創新性的科技成果,它在載玻片大小的芯片上構建了一個完整的生理組織微系統,其中包含有原代肝細胞、肝非實質細胞、生物流體和機械力所需微環境的關鍵要素。這個微型肝臟模型可以在體外模擬人體肝臟的主要結構功能特征和復雜的組織間聯系,為藥物藥效評價、藥物安全性評價、化妝品安全性評價、食品安全性評價、環境保護評價等提供了一種全新的方法和手段。 這個微型肝臟模型的研發,是在對傳統的肝臟模型進行改進和創新的基礎上實現的。傳統的肝臟模型通常是基于動物實驗或體外細胞培養的方法,但這些方法存在著很多的局限性和缺陷。例如,動物實驗不僅存在著倫理和道德問題,而且還存在著種屬差異、生理反應差異等問題;而體外細胞培養則存在著細胞失活、細胞分化等問題。因此,Organ-on-a-chip的出現,填補了這些傳統方法的空白,為科學研究和工業應用提供了更加可靠和有效的手段。中山鵝原代肝細胞提取原代肝細胞是一種重要的研究工具,可以為肝臟疾病的研究和攻克提供有力的支持。
貼壁培養的原代肝細胞是酶誘導研究的重要模型。這種模型可以通過倍數變化方法來評估藥物是否為酶的誘導劑。具體來說,研究人員可以使用已知的陽性和陰性對照藥物來校準體外系統,然后將研究藥物與細胞共孵育,測定孵育后CYP酶的mRNA表達水平倍數變化,以評估藥物是否為酶的誘導劑。這種方法可以幫助研究人員更好地了解藥物相互作用的機制,從而更好地指導臨床用藥。 酶誘導是一種藥物相互作用的現象,指某些化合物能夠提高肝臟藥物代謝酶的活性,從而導致合用的藥物代謝速率加快,使得原藥的血藥濃度下降,進而使其療效降低或喪失。這種現象在臨床上非常常見,因為許多藥物都需要通過肝臟代謝酶來進行代謝,而酶誘導會影響這些代謝酶的活性,從而影響藥物的代謝。 酶誘導的機制是通過影響肝臟細胞內的CYP酶的表達和活性來實現的。CYP酶是肝臟細胞內重要的藥物代謝酶之一,它能夠代謝許多藥物和毒物,從而使它們被代謝出體外。當某些化合物進入體內后,它們會與CYP酶結合并使它們的特異性表達,從而使得CYP酶能夠更快地代謝藥物和毒物,使其被代謝出體外。 原代肝細胞依舊是目前理想的體外模型,是藥物代謝研究的重要組成部分。
如何提高原代肝細胞的存活率?原代肝細胞是指直接從生物體肝臟中分離出來的肝細胞,其存活率的提高可以通過以下方法實現:1.選擇合適的分離方法:選擇合適的分離方法可以提高原代肝細胞的存活率。例如,可以使用膠原酶消化法或機械分離法等方法分離肝細胞。2.控制培養條件:原代肝細胞的培養條件對其存活率有很大影響。例如,培養溫度、濕度、氧氣含量、培養基成分等都需要嚴格控制。3.使用合適的培養基:選擇合適的培養基可以提高原代肝細胞的存活率。例如,可以使用含有肝細胞生長因子、胰島素等成分的培養基。4.控制細胞密度:原代肝細胞的密度對其存活率也有很大影響。如果細胞密度過高,會導致細胞缺氧和營養不足,從而降低存活率。因此,需要控制細胞密度,使其保持在適當的范圍內。5.添加細胞保護劑:添加細胞保護劑可以提高原代肝細胞的存活率。例如,可以添加谷胱甘肽、維生素E等抗氧化劑,以減少細胞氧化損傷。6.定期更換培養基:定期更換培養基可以防止細胞代謝產物積累和營養不足,從而提高原代肝細胞的存活率。總之,提高原代肝細胞的存活率需要綜合考慮多種因素,包括分離方法、培養條件、培養基、細胞密度、細胞保護劑等。 立沃生物的原代肝細胞配套有多種細胞培養試劑,包括細胞培養基、細胞因子等,為后續研究保駕護航。
近年來,隨著細胞培養技術和分子生物學技術的不斷發展,原代肝細胞在基礎研究中的應用的作用越來越重要,取得了一系列重要進展。 首先,原代肝細胞在肝臟發育和再生方面的研究中發揮了重要作用。研究表明,原代肝細胞可以分化為多種肝細胞類型,如肝細胞、膽管細胞和星形細胞等,從而為肝臟發育和再生提供了重要的細胞來源。此外,原代肝細胞還可以通過體外培養和移植等方法促進肝臟再生和修復。 其次,原代肝細胞在肝臟疾病的研究中也有重要應用。研究表明,原代肝細胞可以模擬肝臟疾病的發生和發展過程,如肝纖維化、liver cancer等,從而為疾病的機制研究和新藥開發提供了重要的實驗模型。此外,原代肝細胞還可以用于篩選和評價肝臟疾病的藥物開發。 原代肝細胞在藥物代謝和毒性研究中也有重要作用。研究表明,原代肝細胞可以模擬肝臟對藥物的代謝和毒性反應,從而為藥物的安全性評價和藥代動力學研究提供了重要的實驗模型。此外,原代肝細胞還可以用于篩選和評價藥物的代謝和毒性。 原代肝細胞在基礎研究中的應用前景廣闊,將為肝臟生理和病理的研究以及藥物開發和安全性評價等方面提供重要支持立沃生物的原代肝細胞來源于不同的動物品系,以滿足客戶的個性化需求。汕尾小鼠原代肝細胞懸浮
立沃生物的原代肝細胞活力高,貼壁效果好,現貨供應,周期短,滿足基礎研究與藥物開發的個性化需求。北京牛原代肝細胞圖片
原代肝細胞的體外擴增不是一件容易的事。原代肝細胞是一種非常重要的細胞類型,具有豐富的酶系和多種特異性功能,因此被大量用于生物化學、實驗性肝損傷、藥代動力學、毒理學和cancer等研究。然而,這些細胞在體外的存活能力非常有限,所以分離并培養出高活性的原代肝細胞并不是一件容易的事情。 分離高質量的原代肝細胞,需要采用一系列復雜的技術和方法。首先,需要選擇合適的動物模型,以獲得足夠數量的肝組織。然后,需要對肝組織進行消化和分離,通常使用的方法包括機械分離、膠原酶消化、胰蛋白酶消化等。在分離過程中,需要注意避免對細胞的損傷,以保證細胞的活力和功能完整性。 分離出的原代肝細胞也需要按照嚴格的標準進行培育。原代肝細胞需要在適當的培養基中進行培養,以提供必要的營養和生長因子。在培養過程中,需要注意細胞的密度、溫度、氧氣濃度、pH值等因素,以保證細胞的正常生長和分化。此外,還需要添加適當的藥物和化合物,以模擬體內的生理環境和病理狀態,以便進行相關研究。 分離并培養出高活性的原代肝細胞是進行肝臟相關研究的關鍵步驟之一。雖然這個過程非常復雜和困難,但是通過不斷的努力和創新,我們相信會有更多的突破和進展。北京牛原代肝細胞圖片