美國雙分子層膜片鉗電生理技術

來源: 發布時間:2025-05-21

ePatch雖然設備非常小巧,但功能完備,傳統膜片鉗設備能做的實驗,用ePatch幾乎都能做。具有voltage-clamp,current-clamp,zerocurrent-clamp三種模式,自動電極電壓飄移補償,C-fast-C-slow-R-series-P/N補償,Bridgebalance補償等功能。可以做全細胞記錄也可以做單通道記錄,膜片鉗技術常做的離子通道電流,突觸后電流,動作電位檢測等實驗都能輕松實現。公司還為此開發了友好的控制和記錄軟件,筆者上手接觸了一下,發現跟AXON的軟件類似,并且程序編輯更為簡單易用。所記錄到的數據可以直接使用Clampfit進行分析,可以說對于使用過AXON設備的膜片鉗工作者來說,上手毫無難度。滔博生物TOP-Bright專注基于多種離子通道靶點的化合物體外篩選,服務于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實驗結果,專業團隊,7*61小時隨時人工在線咨詢.膜片鉗技術的建立,對生物學科學特別是神經科學是一資有重大意義的變革。美國雙分子層膜片鉗電生理技術

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現在這塊全新的芯片被放置在了跟前置放大器大小類似的小盒子中,便成就了這款全球較小的膜片鉗放大器ePatch。體積大幅縮減只是一個表面,由于細胞電信號在被電極記錄到后,直接進入了芯片,以較短的路徑直接從模擬信號轉變成了數字信號,在很大程度上減少了環境及電路噪音對信號的影響,所以這款放大器便可以輕易獲取非常高質量且穩定的電生理信號。ePatch體積只為42*18*78mm,重量200g,整套設備的大小只相當于傳統膜片鉗設備的前置放大器,可以輕松地放入衣服口袋。用USB接口連接電腦后即可使用,無需額外電源,連接和使用都極為簡便。沒有了占地方的放大器,數模轉換器以及相互連接的眾多電線,電源線等等,我們的膜片鉗又進一步減小了體積。德國全自動膜片鉗高阻抗封接用膜片鉗技術,輕松捕捉離子通道的每一個細微動作!

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高阻封接問題的解決不僅改善了電流記錄性能,還隨之出現了研究通道電流的多種膜片鉗方式。根據不同的研究目的,可制成不同的膜片構型。細胞吸附膜片(cell-attachedpatch)將兩次拉制后經加熱拋光的微管電極置于清潔的細胞膜表面上,形成高阻封接,在細胞膜表面隔離出一小片膜,既而通過微管電極對膜片進行電壓鉗制,分辨測量膜電流,稱為細胞貼附膜片。由于不破壞細胞的完整性,這種方式又稱為細胞膜上的膜片記錄。此時跨膜電位由玻管固定電位和細胞電位決定。因此,為測定膜片兩側的電位,需測定細胞膜電位并從該電位減去玻管電位。從膜片的通道活動看,這種形式的膜片是極穩定的,因細胞骨架及有關代謝過程是完整的,所受的干擾小。

在膜片鉗技術的發展過程中主要形成了五種記錄模式,即細胞貼附模式(cell-attachedmode或loose-seal-cellattachedmode)、膜內面向外模式(inside-outmode)、膜外面向外模式(outside-outmode)、常規全細胞模式(conventionalwhole-cellmode)和穿孔膜片模式(perforatedpatchmode)。a.亞細胞水平:細胞貼附模式,可記錄通過電極下膜片中通道蛋白的離子電流(紅色虛線箭頭)。在全細胞膜片鉗中,膜片破裂,因此可以記錄全細胞的宏觀電流,它表示整個細胞的總和電流(藍色虛線箭頭)。b.細胞水平:來自神經元不同部分的全細胞同步記錄可確定信號傳遞的方向。c.神經元網絡水平:全細胞記錄可以在一個連接神經元的小網絡中進行。d.活物水平:可以在執行任務或自由走動的動物大腦中進行全細胞記錄。神經遞質的釋放、腺體的分泌、肌肉的運動、學習和記憶。

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ePatch的設計的一些亮點還包括:可以在軟件中伴隨數據進行實驗記錄,你不用再專門拿一個實驗記錄本了,也不用再擔心本本上記錄的內容找不到對應的數據了,系統會把他們一一對應起來。電壓電流刺激模式的編輯更為傻瓜,眾多的模塊,直接拖拽就可以,還伴隨著示例圖,讓你對你編輯的程序一目了然。實時的全細胞參數估算,包括封接電阻,膜電容,膜電阻等重要參數強大的在線分析功能,包括電壓鉗模式下的I/Vgraph,eventdetection,FFT,以及電流鉗模式下的APthresholddetection,APfrequency,APslope等數據可保存成多種格式,你要是個程序達人,可以支持使用Matlab進行數據分析,如果沒有這樣的經驗也沒有問題,數據可以保存成.abf用的Clampfit直接分析。滔博生物TOP-Bright專注基于多種離子通道靶點的化合物體外篩選,服務于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實驗結果,專業團隊,7*60小時隨時人工在線咨詢.膜片鉗實驗服務|離子通道|膜片鉗CRO|因斯蔻浦。多通道膜片鉗腦片

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內面向外膜片(inside-outpatch)高阻封接形成后,在將微管電極輕輕提起,使其與細胞分離,電極端形成密封小泡,在空氣中短暫暴露幾秒鐘后,小泡破裂再回到溶液中就得到“內面向外”膜片。此時膜片兩側的膜電位由固定電位和電壓脈沖控制。浴槽電位是地電位,膜電位等于玻管電位的負值。如放大器的電流監視器輸出是非反向的,則輸出將與膜電流(Im)的負值相等。外面向外膜片(out-sidepatch)高阻封接形成后,繼續以負壓抽吸,膜片破裂再將玻管慢慢地從細胞表面垂直地提起,斷端游離部分自行融合成脂質雙層,此時高阻封接仍然存在。而膜外側面接觸浴槽液。這種膜片形式應測膜片電阻,并消除漏電流和電容電流。整個過程要當心是否形成囊泡。如果浴槽保持地電位水平,膜電位即與玻管電位相等。如放大器是非反向的,放大器的輸出將與Im值相等。美國雙分子層膜片鉗電生理技術

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