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通常被稱為內(nèi)生菌(endophyte)。植物內(nèi)生菌對(duì)植物病蟲害防治、農(nóng)作物增產(chǎn)、提高藥用植物品質(zhì)和藥效、維護(hù)生態(tài)系統(tǒng)平衡等諸多方面具有重要意義,同時(shí)可以作為潛在的生防載體菌而加以利用。從藻類、蕨類,到木本、藤本的維管束植物,幾乎所有類群的植物體內(nèi)都含有內(nèi)生菌。主要包括內(nèi)生細(xì)菌、內(nèi)生***、內(nèi)生放線菌。其中***占絕大多數(shù)、而細(xì)菌中有三分之二是革蘭氏陰性菌。如何獲得植物內(nèi)生菌DNA?植物內(nèi)生菌DNA的提取有著2大難點(diǎn):1。土壤DNA提取助力藥物研發(fā)。寶山區(qū)FastDNA SPIN土壤試劑盒土壤DNA提取聯(lián)系方式
取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有石英膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;FastDNA SPIN土壤試劑盒土壤DNA提取參數(shù)網(wǎng)上訂購?fù)寥繢NA提取的官網(wǎng)。
土壤中含有大量的二氧化硅成分,因此,對(duì)土壤樣品進(jìn)行DNA提取時(shí),需要考慮樣品來源的二氧化硅對(duì)DNA的結(jié)合,一旦DNA與樣品來源的二氧化硅發(fā)生結(jié)合,DNA就會(huì)隨著土壤固體顆粒物質(zhì)一起被去除。 尿液中含有一定量的DNA,可以通過多種方法提取DNA,并用于PCR檢測、STR分型檢測、二代測序分析;但是,尿液中DNA含量較低,尿液浸潤土壤后,被土壤吸附的DNA含量更低,要針對(duì)土壤尿液進(jìn)行DNA提取,具有一定難度。 技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素: 本發(fā)明為解決上述存在的問題,提供了一種土壤尿液DNA提取試劑盒及方法,其解決技術(shù)問題的技術(shù)方案是: 土壤尿液DNA提取試劑盒,包括以下試劑:
l. Nicotiana tabacum seed endophytic communities share a commoncore structure and genotype-specific signatures in diverging cultivars【J】.Computational and Structural Biotechnology Journal, 2020, 18。本發(fā)明屬于核酸提取純化技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種土壤尿液DNA提取試劑盒及方法。 背景技術(shù): 二氧化硅能在鹽和特定pH值條件下可逆的結(jié)合DNA,這也是硅珠法、磁珠法、硅膠膜法提取DNA的理論基礎(chǔ);在高濃度離液鹽和低pH值條件下,二氧化硅能通過氫鍵與DNA結(jié)合,而蛋白質(zhì)、脂類、糖類等雜質(zhì)因不能被結(jié)合從而被去除,去除離液鹽、提高pH值之后,DNA與二氧化硅之間的相互作用力減弱,DNA從二氧化硅表面釋放,從而獲得純化的DNA;上海益啟生物的土壤DNA提取價(jià)格大概多少?
(a)土壤裂解液,其組成成分包括表面活性劑、螯合劑、pH緩沖劑; 所述表面活性劑為:十二烷基硫酸鈉、十二烷基磺酸鈉、月桂酰基肌氨酸鈉、聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN 20、TWEEN 40、TWEEN 60、TWEEN 80、NP 40、十六烷基三甲基溴化銨中的一種或兩種及以上的混合,所述表面活性劑的質(zhì)量濃度為1-100g/L,推薦的表面活性劑成分是十二烷基硫酸鈉或十二烷基磺酸鈉中的一種或兩種的混合,推薦的表面活性劑質(zhì)量濃度為1-10g/L; 所述螯合劑為乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸三鉀中的一種或兩種,所述離液鹽的濃度為1-100 mmol/L;上海益啟土壤DNA提取批發(fā)價(jià)。FastDNA SPIN土壤試劑盒土壤DNA提取參數(shù)
土壤DNA提取上海授權(quán)代理商——上海益啟生物科技有限公司。寶山區(qū)FastDNA SPIN土壤試劑盒土壤DNA提取聯(lián)系方式
bed soil、Saline soil、Desert soil。Yield(ng/mg sample):47.78+0.21、16.03+0.06、14. 88+0.65、7.55+0.65、1.64+0.19。260/280:1.79+0.01、1. 94+0.01、1. .84+0.01、1. 89+0.01、1.85+0.06。260/230:1.10+0.02、1.70+0.04、1.20+0.04、1. 40+0.00、1.02+0.00。結(jié)論:SPINeasy DNA Kit for Soil可用于提取多種類型土壤基因組DNA,提取濃度高、純度好。2.提取不同類型土壤基因組DNA電泳結(jié)果。Figure 1: gDNA extracted from different soil samp寶山區(qū)FastDNA SPIN土壤試劑盒土壤DNA提取聯(lián)系方式