檢測試劑盒運用注意事項:在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為15~20min即可。若顏色較淺,可延長反響時間到30min。反之,則減短反響時間。反響停止液為2M硫酸,防止接觸皮膚。不要運用過了有用日期的檢測試劑盒;也不要運用過了有用期的試劑盒中的任何試劑,摻雜運用過了有用期的檢測試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交流運用不同批號試劑盒中的試劑。試劑盒具有的幾個優點:吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;穩定的重復性和可靠性;靈敏、特異的抗體。稀釋過的血液樣本小心鋪到Ficoll分離液上面。蔗糖-PBS溶液(5%)
PH緩沖液:正常人血漿的pH值為7.35~7.45。血漿PH值的相對恒定性有賴于血液內的緩沖物質以及正常的肺、腎功能。血漿的緩沖物質包括NaHCO3/H2CO3、蛋白質鈉鹽/蛋白質和Na2HPO4/NaH2PO4三個主要的緩沖對,其中以NaHCO3/H2CO3較為重要。紅細胞內還有血紅蛋白鉀鹽/血紅蛋白、氧合血紅蛋白鉀鹽/氧合血紅蛋白、K2HPO4/KH2PO4、KHCO3/H2CO3等緩沖對參與維持血漿PH值的恒定。當酸性或堿性物質進入血液時,血漿中的緩沖物質可有效的減輕酸或堿性物質對血漿PH值的影響,特別是肺和腎保持正常的排出體內過多的酸或堿的功能的情況下,血漿PH值的波動范圍極小。Tris-Tricine陽極緩沖液(5×,pH8.9)殺滅曲線的建立:第2天換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。
酶的校正:要滿足在同一方法學、同一測定條件、與理論計算的FACTOR值差異不大,沒有發現有明顯影響因素,方可 進行校正。檢驗結果溯源性,得建立一個可靠的參考系統作為準確性基礎,然后將準確性轉移到常規方法測定中去,使常規方法測定結果可溯源到參考系統所提供的準確性基礎上來。在實現溯源性目標過程中,永遠以患者新鮮標本為實驗對象,以方法學對比試驗方法為驗證手段。方法學對比試驗常采用回歸方程進行統計分析,假如斜率接近1,截距較小,這意味著實驗室常規方法對標本測定結果和溯源目標參考系統對標本檢測結果非常接近。
具體的檢測試劑盒規矩說明操作方法:汲取液體時要選用量程和需求量接近的微量加樣器吸,減少差錯。液體悉數參加酶標孔后,將酶標板放在桌子上平行悄悄搖晃30s,檢測試劑盒使液體充沛混合均勻,也使其得到充沛的反應。孵育時要使蓋板膜封好酶標板,避免水分蒸騰,以防曲線不成線性。試驗前的30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標板只要取出所需量。因為底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。手工洗板時每次參加洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,避免交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。DC細胞誘導:胞形態,至細胞毛刺樣突起,有典型DC形態懸浮細胞。
測定血清中的某些酶,如CK,離體(采集血液)后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基(一SH)被氧化造成的。只有通過適當的還原作用才能重新開始。如CK—NAC檢測試劑盒即含有CK活化劑,名為N一乙酰半胱氨酸。實驗研究證明,NAC對血清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測定為什么要延遲時間較長的理論依據。在AST,ALT采用IFCC推薦方法測定時需要磷酸吡哆醛預活化。需要強調:含有活化劑的生化試劑,其測定酶活性的結果要高些。利福平不能經血液透析或腹膜透析除去。草酸水溶液(2%)
一切試劑瓶蓋須蓋緊以避免蒸騰和污染,試劑避免受到微生物的污染。蔗糖-PBS溶液(5%)
pH緩沖溶液的類型與作用:pH緩沖溶液包括兩大類:標準緩沖溶液和普通緩沖溶液。標準緩沖溶液主要用在酸度計測量溶液pH值時的儀器校正和定位,要求數值準確、精確。因此對試劑純度、濃度準確性、溫度等都有嚴格要求,這類緩沖溶液有專門的化學試劑商品,可以購買配制,也可以用優級純試劑按資料的配比配制。普通緩沖溶液主要用于化學分析和儀器分析中要控制一定pH值的測定過程中。幾乎所有的EDTA絡合滴定都必須在一定的pH范圍內進行,因此,需要加入pH緩沖溶液,例如,測定鉛、鋅用到HAc緩沖溶液,測定鈣、鎂、鋅用到氨緩沖溶液。又如,氧化還原滴定中,碘量法測銅要用到NH4HF2,碘量法測砷、銻要加NaHCO3。蔗糖-PBS溶液(5%)