市場上使用的病毒保存液主要有兩種,一種是以運送培養基為基礎改良的病毒維持液,另一種則為核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基礎培養液(MEM)或Hank's平衡鹽,添加了病毒生存所需的鹽類、氨基酸、維生素、葡萄糖以及蛋白質,這種保存液使用酚紅鈉鹽做為指示劑,溶液pH值在6.6-8.0時溶液呈粉紅色。保存液中添加了必須的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白質,蛋白質的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以穩定病毒的蛋白質外殼。由于保存液營養成分豐富,有利于病毒的成活但是也有利于細菌的生長,如果保存液中污染了細菌,則會大量繁殖,其代謝產物中的二氧化碳會使保存液pH值下降,從粉紅色變為黃色。因而大多數廠家都在配方中添加了抑菌劑成分,推薦使用的抑菌劑為青霉素、鏈霉素、慶大霉素及多粘菌素B等,不推薦使用疊氮鈉、2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(MCI)和
5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制劑,因為這些組分對PCR反應有影響。由于這種保存液提供的樣本基本是活病毒,可以很大程度保持樣本的原始性,后續不僅可以用于病毒的核酸提取檢測,還能用于病毒的培養和分離。但是用于檢測時應該注意的是必須滅活以后再進行核酸提取純化。
除了用于核酸提取檢測外,還能用于病毒的培養分離以及抗原的檢測等但是采樣后長時間保存需要保持嚴格低溫。惠州病毒保存管病毒保存液什么價格
病毒采樣管由拭子+采樣管+病毒保存液三部分構成。病毒保存液包括Hank's液基礎、慶大霉素、、BSA (V)、冷凍保護劑、生物緩沖劑和氨基酸。在Hank's基礎之上,添加4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、BSA(牛血清白蛋白第五組分)等病毒穩定成分,可在較寬的溫度范圍內維持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分離的陽性率。
病毒保存液的質量,是提高PCR檢測陽性率與病毒分離陽性率的關鍵因素,從根本上決定了病毒采樣管的質量。添加常溫穩定的類,可解決采樣后的霉菌污染問題,實現采樣液的常溫保存。 國內非滅活型病毒保存液哪家好還可以用于各種病毒樣品、衣原體樣品包括近肆虐全球的原樣品的取樣。
病毒保存液(滅活型)采用高濃度的胍鹽可以快速對呼吸道病原體進行滅活、保存,,使樣品失去性,里面含有的Tris、裂解鹽、EDTA等主要目的是裂解核酸而釋放出核酸,從而通過后續的實時熒光RT-PCR進行核酸檢測,以此判斷樣本是否含有病毒特征核酸,即是否病毒。操作簡單無需配液,體系內含有高效病毒裂解液,采樣后即刻滅活病毒,有效防止二次風險。 產品采樣前可常溫保存12個月,采樣后樣本可常溫保存一周,密閉性好,方便保存運輸,節省運輸成本。內含核酸Rnase酶抑制劑,更大化程度保護病毒核酸穩定不被降解,大幅提高核酸提取效率。
滅活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,液體含有高濃度的裂解鹽,能夠迅速高效地使待測樣本里的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止,同時又含有Rnase酶抑制劑,能保護病毒核酸不被降解,后續的NT-PCR實驗只要能檢測出病毒的核酸既可以做出診斷。而且能夠在常溫下保存相對較長的時間。
病毒的檢測不同于常規的生化檢測,病毒本身是一種結構簡單的微生物,必須 寄生在活細胞內。采樣后,病毒離開寄主細胞,在采樣管內其蛋白質外殼和核酸都會很快降解,這樣核酸檢測時就無法判斷初始采集的樣本是否含有病毒,容易造成假陰性。 可以用來采集咽拭子鼻拭子或者特定部位的組織樣本儲存的樣本可以用于后續的核酸檢測或者病毒培養臨床實驗。
病毒采樣管-適用于、流感病毒、禽流感(如H7N9)、手足口病毒、麻疹等病毒標本以及支原體、脲原體、衣原體標本的采集及運送。病毒及相關樣本的冷藏狀態下(2-8℃)的48小時內保存與運輸。病毒及相關樣本的-80℃環境或液氮環境中的長時間保存。
病毒采樣管搜集病毒的采樣方法
1、先用壓舌板壓住舌頭,然后將采樣拭子頭部伸入咽喉部位擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁,輕度用力拭抹咽后壁部位,應避免觸及舌部。
2、以拭子測量鼻尖到耳垂的距離并用手指做標記,將采樣拭子以垂直鼻子(面部)方向插入鼻腔,拭子伸入距離少應達耳垂部位到鼻尖長度的一半,使拭子在鼻內停留15-30秒,輕輕旋轉3-5次,抽出拭子。
非滅活型的主要優點是檢出率高,缺點是具有一定的危險性。四川滅活病毒保存液廠家批發價
可在較寬的溫度范圍內維持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分離的陽性率。惠州病毒保存管病毒保存液什么價格
采樣前,在標簽上注明樣品信息;
根據不同的實驗目的,用采樣拭子在相應的部位采樣;
采樣后迅速將拭子放入含病毒運送培養基采樣管中,在折斷點處將其折斷,旋緊管蓋;
使用滅活款采樣管新鮮采集的標本,可在常溫(5-25°C)條件下,7天內運送至實驗室,運輸時有冰袋的效果會更好。用于核酸檢測的標本,24小時內檢測效果更好。
具體采樣方法如下:
(1)鼻拭子:將拭子頭輕輕插入鼻道內鼻腭處,停留片刻后緩慢轉動退出。以另一拭子拭另側鼻孔,將拭子頭浸入采樣液中,在折斷點處將其折斷,棄之。(適合用本產品采樣)
(2)咽拭子:用拭子擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁,同樣將拭子頭浸入采樣液中,棄之。(適合用本產品采樣)。 惠州病毒保存管病毒保存液什么價格
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