酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取后,需用一些蛋白酶,如膠原酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解,得到不同的酶促溶性膠原蛋白。所使用的蛋白酶主要分3種:動物蛋白酶(如胰蛋白酶,胃蛋白酶),植物蛋白酶(如木瓜蛋白酶,菠蘿蛋白酶),微生物蛋白酶(如堿性蛋白酶,中性蛋白酶)。在對酶法水解膠原蛋白的研究中,以堿性蛋白酶應用較多。將膠原進行限制性降解,即將末端肽切割下來,由于膠原肽鏈間的共價鍵都是通過分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的,末端肽被切下后,含三螺旋結構的主體部分可溶于稀有機酸而被提取出來。用酶處理,可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽,提高膠原蛋白的產率;而且還不會破壞膠原蛋白的三股螺旋結構,保持其特性。影響酶提取的因素有很多,如酶濃度、酶與底物的比例、酶解時間、酶解溫度、pH值以及料液比等。在實際操作中,大多數采用酶復合法提取膠原蛋白,較多的是使用胃蛋白酶提取,有機酸多為乙酸。 膠原三肽主要具有以下功能:保濕。天津魚膠原蛋白廠家
交聯指使膠原分子內部和分子間通過共價健結合提高膠原纖維的張力和穩定性的方法。該法又分為物理方法、化學方法和低溫等離子體法,生物學方法;其中物理方法、化學方法是較常用的交聯改性方法,生物學方法改性膠原蛋白主要在研究有關動物老化的生命現象中涉及,在研制膠原基生物醫學材料中少見報道。[74][127]物理方法通過物理手段對膠原蛋白改性有紫外線照射、重度脫水、λ射線照射和熱交聯等方法。膠原溶液如被紫外線等照射,將在分子間產生交聯,粘度增加,生成凝膠。常用的紫外線交聯膠原膜的方法是將膠原膜放在鋁箔上,距離254nm紫外燈20cm高度,照射1~5h。對紫外線照射的膠原膜進行力學性能和膠原酶試驗表明:交聯膠原膜的萎縮溫度Ts和抗膠原酶解的能力均明顯高于未交聯膠原膜。[128]重度脫水也是膠原蛋白物理改性中常使用的方法,該法是通過脫水導致膠原分子間交聯,從而增加變性溫度,改善膠原的性能。改性后膠原膜生物相容性提高,降低了水溶性,影響了膜與成骨細胞的生物相容性。物理方法改性原蛋白的優點是可避免外源性有毒化學物質進入膠原內,缺點是膠原膜交聯度低,且難以獲得均勻一致的交聯。 湖北骨膠原蛋白固體飲料氨基酸分子進入人體后,合成膠原蛋白,較終被人體吸收。
膠原蛋白是一類蛋白質家族,已至少發現了30余種膠原蛋白鏈的編碼基因,可以形成16種以上的膠原蛋白分子,根據其結構,可以分為纖維膠原、基膜膠原、微纖維膠原、錨定膠原、六邊網狀膠原、非纖維膠原、跨膜膠原等。根據它們在體內的分布和功能特點,可以將膠原分成間質膠原、基底膜膠原和細胞外周膠原。間質型膠原蛋白分子占整個機體膠原的絕大部分,包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型膠原蛋白分子,Ⅰ型膠原蛋白主要分布于皮膚、肌腱等組織,也是水產品加工廢棄物(皮、骨和鱗)含量較多的蛋白質,占全部膠原蛋白含量的80%~90%左右,在醫學上的應用較為比較廣。Ⅰ型膠原在魚類膠原中一個較明顯的的特點是熱穩定性比較低,并呈現有魚種的特異性。Ⅱ型膠原蛋白由軟骨細胞產生;基底膜膠原蛋白通常是指Ⅳ型膠原蛋白,其主要分布于基底膜;細胞外周膠原蛋白通常中指Ⅴ型膠原蛋白,在結締組織中大量存在。按功能,可將膠原分為兩組,首先組是成纖維膠原,包括第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅺ、ⅩⅩⅣ和ⅩⅩⅦ型膠原;其余是第二組,非成纖維膠原。非成纖維膠原的α-鏈既含有三螺旋域(膠原域,COL),還含有非三螺旋域(非膠原域,NC),其中成纖維膠原約占膠原總數的90%。
膠原蛋白是生物高分子,動物結締組織中的主要成分,也是哺乳動物體內含量較多、分布較廣的功能性蛋白,占蛋白質總量的25%~30%,某些生物體甚至高達80%以上。 畜禽源動物組織是人們獲取天然膠原蛋白及其膠原肽的主要途徑,但由于相關畜類疾病和某些宗教信仰限制了人們對陸生哺乳動物膠原蛋白及其制品的使用,現今正在逐步轉向海洋生物中開發。歐洲食品安全局(EFSA)已證實了即使是動物骨骼來源的膠原蛋白也不存在傳染瘋牛病和其它相關疾病的可能。膠原蛋白就好比一鍋才煮了一會兒的奶白色雞湯。
作為生物高分子,膠原的強度不大,有研究表明膠原蛋白的凝膠強度與其濃度的平方幾乎成正比關系,強度測定可用凝膠強度計。特別提示:明膠、膠原蛋白和水解膠原蛋白并不相同。明膠是膠原在高溫作用下的變性產物,其組成復雜,相對分子質量分布寬,由于高溫造成膠原蛋白變性,膠原分子的3股螺旋結構被破壞,但可能有部分α鏈的螺旋鏈還存在,因此一定濃度的明膠溶液能成凝膠狀。在食品工業、攝影和制藥業中被廣泛應用。據報道,全世界每年生產的明膠產品中,有65%用于食品工業,20%用于照相工業,10%用于制藥工業。水解膠原蛋白是在較高溫度下用蛋白酶水解膠原或明膠得到的,受溫度和酶的雙重作用,使水解膠原蛋白的相對分子質量比明膠更小,由于在較高溫度條件下,蛋白酶對膠原肽鍵的水解是隨機的,使水解得到的蛋白液組成也很復雜,是相對分子質量從幾千到幾萬的蛋白多肽的混合物。由于分子量小,水解膠原蛋白容易降解,所以在營養保健品和日用化學品開發方面擁有一定的市場。水解膠原蛋白可用于生物發酵培養基,也可以作為一種高蛋白飼料營養添加劑替代進口魚粉用于混、配合飼料生產。膠原、明膠和水解膠原蛋白這3種物質雖具有同源性,但在結構和性能上卻有很大的區別。 采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動物皮及其加工副產物中。遼寧深海鱈魚膠原蛋白液體飲品
膠原的熱穩定性是指測定其在水系中纖維的熱收縮溫度。天津魚膠原蛋白廠家
膠原蛋白亦可用于食品,早在十二世紀Bingen的,在相當長的一段時間里,含膠原的一些產品被人們認為對關節是很有益處的。因為它具有適用于食品的一些屬性:食用級通常外觀為白色,口感柔和,味道清淡,易消化。可以降低血甘油三酯和膽固醇,并可以增高體內某些缺乏的必需微量元素使之維持在一個相對的正常范圍之內,它是一種理想的降血脂食品。此外,有研究表明,膠原蛋白可以協助排除體內的鋁,減少鋁在體內的聚集,降低鋁質對人體的危害,并一定程度上促進指甲和頭發的生長。Ⅱ型膠原是關節軟骨中的主要蛋白,因而是潛在的自身抗原。口服后能誘導T細胞產生免疫耐受,從而抑制T細胞介導的自身免疫性疾病。膠原多肽是膠原或明膠經蛋白酶等降解處理后制得的具有較高消化吸收性、分子量約為2000~30000的產物,不具有明膠的凝膠性能,市場上銷售的膠原多為膠原多肽。 天津魚膠原蛋白廠家
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