河南專注ELISA試劑盒

來源: 發布時間:2025-05-27

ELISA,即酶聯免疫吸附測定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay),其試劑盒基于抗原-抗體特異性結合的原理。在試劑盒中,首先將已知的抗原或抗體固定在微孔板的表面。如果檢測樣本中含有相應的抗體或抗原,就會與之特異性結合。然后加入酶標記的二抗或抗原,這種酶標記物能夠與之前結合的物質再次特異性結合。加入底物,在酶的催化作用下,底物發生顏色反應或化學發光反應等可檢測的信號變化。通過檢測信號的強度,可以定量或定性地分析樣本中的目標物質。例如在檢測某種疾病相關蛋白時,樣本中的蛋白與微孔板上固定的抗體結合,后續的反應步驟逐步放大信號,從而實現對低濃度蛋白的精確檢測。蘇州Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動。河南專注ELISA試劑盒

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試劑盒成分1預包被板:抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化96T2酶標記抗體:(30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化0.4mLx13標準品:重組小鼠白介素-60.5mLx24EIA緩沖液:含1%BSA,0.05%吐溫20BPS30mLx15標記抗體稀釋液:含1%BSA,0.05%吐溫20BPS12mLx16顯色劑:TMB底物液15mLx17終止液:1N硫酸12mLx18濃縮洗滌液:(40倍濃縮)含1%BSA,0.05%吐溫20BPS50mLx1操作說明1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供)酶標儀(450nm)微移液管及其吸嘴量筒及燒杯去離子水冰箱(4°C)坐標紙(log/log)吸水紙試管(用于標準品稀釋)溫育箱(37°C±1°C)洗瓶(用于洗板)一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)吉林ELISA試劑盒器材青島Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動。

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操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。5.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。6.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。7.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。8.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。9.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。10.底物A應避免揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。11.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。12.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。上海伊麗薩生物科技代理進口ELISA試劑盒,滿足多樣需求。

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在食品安全檢測領域,ELISA試劑盒對農藥殘留的檢測具有重要意義。隨著農業生產中農藥的普遍使用,農藥殘留問題日益受到關注。ELISA試劑盒可以檢測農產品中的有機磷農藥、擬除蟲菊酯類農藥等殘留。例如,對于有機磷農藥,它會抑制生物體內的乙酰膽堿酯酶活性,ELISA試劑盒利用這一特性,通過特異性抗體識別有機磷農藥,當有有機磷農藥存在時,會影響酶的活性,進而影響顯色反應。這種檢測方式快速、靈敏,可以在農產品進入市場前對其進行大規模篩查,確保消費者食用的農產品符合安全標準,減少因農藥殘留導致的健康風險。合肥Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動。武漢專業進口ELISA試劑盒電話多少

實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。河南專注ELISA試劑盒

ELISA試劑盒中的酶標記物是實現檢測信號放大的關鍵因素。酶標記在抗體或抗原上,常見的酶有辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(ALP)等。酶標記物的制備需要精確的技術,要確保酶與抗體或抗原的結合既穩定又不影響它們各自的活性。以HRP標記的抗體為例,HRP具有高效的催化活性,在與目標抗原或抗體特異性結合后,當加入底物時,HRP能夠催化底物發生大量的化學反應,從而將微弱的抗原-抗體結合信號放大為明顯的顯色信號。這種信號放大作用使得ELISA試劑盒能夠檢測到極低濃度的目標物質,提高了檢測的靈敏度。河南專注ELISA試劑盒

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