Sirion慢病毒轉導實驗寶典

慢病毒載體的研究發(fā)展得很快，研究的也非常深入，在美國已經(jīng)開展了臨床研究，效果非常理想，因此具有廣闊的應用前景。慢病毒也被guang fan地應用于表達RNAi的研究中。由于有些類型細胞轉染試劑瞬時轉染效果差，轉移到細胞內的siRNA半衰期短，體外合成siRNA對基因表達的抑制作用通常是短暫的，因而使其應用受到較大的限制。SIRION Biotech 為研究機構和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式，并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。LentiBOOST（Pharma grade）jin用于藥物級的臨床前研究和工藝開發(fā)，以及評估研究。LentiBOOST（GMP grade）用于臨床階段方案，目前美國和歐洲多個 Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗正在進行。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導的相關產品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！為提供更好的服務，上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產品業(yè)務的Exclusive Distributor，LentiBOOST在中國市場的營銷和技術支持工作仍將由上海曼博生物負責。什么是慢病毒轉導增強劑？Sirion慢病毒轉導實驗寶典

影響轉導效率的另一個關鍵參數(shù)是ganran復數(shù)（MOI）,MOI指的是每個細胞ganran的病毒粒子個數(shù)，病毒粒子滴度以ganran單位(IU)/mL或TU/mL表示。慢病毒的ganran能力隨細胞類型的不同而不同，因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI。MOI值越大，慢病毒ganran上的可能性也越大，ganran效率越高，但對細胞的毒性也越大。另外細胞需要的MOI值越大，也說明細胞越難被轉導。SIRIONBiotech為研究機構和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式，并為臨床試驗提供良好的GMP材料供應條件。LentiBOOST目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。更多產品信息歡迎咨詢上海曼博生物，也歡迎關注我們的公眾號查看更多技術文章：Mine-bioGMP級慢病毒轉導條件慢病毒轉染可以使用哪些試劑呢？

研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產生比polybrene更高的轉導效率，且對細胞活力或干細胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉導增強劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案，具有顯著提高基因zhi liao應用中 MSCs 慢病毒轉導效率的潛力。細胞狀態(tài)對于慢病毒轉導效率也具有很大的影響，良好的生長狀態(tài)是達到高gan ran效率的保證，一般選擇細胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對數(shù)生長期的細胞進行gan ran可提高gan ran效率。更多關于Sirion Biotech LentiBOOST相關技術文章，歡迎咨詢上海曼博生物！也可關注我們的公眾號：Mine-bio

LentiBOOST可應用于多種臨床相關細胞類型，包括CD34+造血干細胞（HSCs），間充質干細胞（MSCs），神經(jīng)干細胞，原代T細胞，NK細胞和成纖維細胞等，對于難轉導的小鼠T細胞亦有效。已成為改進體外基因zhi liao和CAR-T細胞zhi liao的臨床轉導方案的理想選擇。近幾年LentiBOOST作為一種無毒性的化學轉導增強劑guang fan引起關注。LentiBOOST通過與細胞膜相互作用降低膜黏稠度,提高脂質交換和跨膜轉運，提高轉導效率。研究證實LentiBOOST在不影響轉導細胞存活、增殖及分化能力的前提下，提高小鼠T細胞、HSCs和人HSCs的慢病毒轉導效率。為提供更好的服務，上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產品業(yè)務的Exclusive Distributor，LentiBOOST在中國市場的營銷和技術支持工作仍將由上海曼博生物負責。有關慢病毒導染的臨床案例。

第三代慢病毒載體系統(tǒng)又增加了兩個安全特性：一是構建了自身失活的慢病毒載體，即刪除了U3區(qū)的3’ LTR，使載體失去HIV-1增強子及啟動子序列，即使存在所有的病毒蛋白也不能轉錄出RNA；二是去除了tat基因，代之以異源啟動子序列，這樣原始的HIV基因組中的9個基因在慢病毒載體中只保留了3個（gag、pol和rev） ，因此第三代慢病毒載體系統(tǒng)更加安全。與第三代系統(tǒng)相比，第二代慢病毒系統(tǒng)使用更多的HIV蛋白（在較少的質粒上）以產生功能性慢病毒顆粒。第三代包裝系統(tǒng)不表示tat，被認為比第二代系統(tǒng)更安全，但可能更難使用，因為它們需要用四個單獨的質粒轉染才能產生功能性慢病毒顆粒。慢病毒包裝系統(tǒng)一般都是三質粒或四質粒包裝系統(tǒng)。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導的相關產品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！為了達到研究目的,在轉導過程中加入轉導增強劑也能有效提高轉導效率。關于慢病毒轉導試劑

加入什么試劑可以提高慢病毒轉導效率？Sirion慢病毒轉導實驗寶典

慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質粒可提供所有的轉錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產生高滴度的慢病毒顆粒，需要利用表達載體和包裝載體同時共轉染293細胞或其衍生細胞，在細胞中進行病毒的包裝，包裝好的慢病毒顆粒分泌到細胞外的培養(yǎng)基中，離心取得上清液后，通過純化濃縮進一步提供慢病毒滴度，即可以直接用于宿主細胞的gan ran。目的基因進入到宿主細胞之后，經(jīng)過反轉錄，整合到基因組，從而高水平的表達效應分子。Sirion慢病毒轉導實驗寶典