調整pH值到6。分裝,滅菌,備用。該培養基用于培養和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。***的培養基在植物組織培養時,通過調節IAA和CTK的比值能影響愈傷組織分化出根或芽。CTK/IAA高時,愈傷組織分化芽。CTK/IAA低時,分化根;CTK/IAA比例適中維持愈傷組織不分化。愈傷組織誘導培養基制備以MS培養基母液為基礎,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養基后,再加入·L-1的BA8mL,·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用·L-1的NaOH和mol·L-1的HCl調整pH值至。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。******葉片愈傷組織誘導取一無菌培養皿,用解剖刀切取1-2片無菌苗葉片置于無菌培養皿中,并用解剖刀將葉片切成2mm2左右的小片,然后將其接種于準備好的培養基上,每瓶接種5小片,一共接種6瓶。接種后的三角平置于24條件下黑暗培養1周。一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的加以選用。浦東新區智能即用型培養基以客為尊
如血漿、血清、***、雞胚浸出液等。組織培養技術建立早期,體外培養細胞都是利用天然培養基。但是由于天然培養基制作過程復雜、批間差異大,因此逐漸為合成培養基所替代。***使用的天然培養基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。血清種類目用于組織培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。選擇用牛血清培養細胞的原因:來源充足、制備技術成熟、經過長時間的應用考驗人們對其有比較深入的理解。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。牛血清是細胞培養中用量**大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,具有極為重要的功能。牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質**高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分**少。血清樣本血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚。虹口區特色即用型培養基建筑培養基成分的稱取培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂。
用于培養霉菌的加入蔗糖,用于培養酵母菌的加入葡萄糖),補足水分,分裝,滅菌,備用。把這培養基的pH值調到,配方中的糖,如用葡萄糖還可用來培養放線菌和芽孢桿菌。豆芽汁培養基黃豆芽100g,瓊脂15g,葡萄糖20g,水1000ml洗凈黃豆芽,加水煮沸30分鐘。用紗布過濾,濾液中加入瓊脂,加熱溶解后放入糖,攪拌使它溶解,補足水分到1000ml,分裝,滅菌,備用。把這培養基的pH值調到,可用來培養細菌和放線菌。豌豆瓊脂培養基豌豆80粒,瓊脂5g,水200ml瓊脂取80粒干豌豆加水,煮沸1小時,用紗布過濾后,在濾液中加入瓊脂,煮沸到溶解,分裝,滅菌,備用。食用菌菌種培養基馬鈴薯-蔗糖-瓊脂培養基20%馬鈴薯煮汁1000ml,蔗糖20g,瓊脂18g把馬鈴薯洗凈去皮后,切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200g,加水1000ml,煮沸20分鐘后,過濾。在濾汁中補足水分到1000ml,即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,補足水分,分裝,滅菌,備用。使用該培養基對pH值要求不嚴格,可以不測定。綜合馬鈴薯培養基20%馬鈴薯煮汁1000ml,磷酸二氫鉀3g,硫酸鎂,葡萄糖20g,維生素10mg,瓊脂18g先配制20%馬鈴薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各種組分,加熱溶解后補足水分。
轉用文火燉2小時。過濾,濾出的肉末干燥處理,濾液pH值調到。每支試管內加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,滅菌,備用。根瘤菌培養基葡萄糖10g,磷酸氫二鉀,碳酸鈣3g,硫酸鎂,酵母粉,水1000ml,1%結晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。放線菌培養基淀粉硝酸鹽培養基(高氏一號培養基)可溶性淀粉,硝酸鉀,磷酸氫二鉀,氯化鈉,硫酸鎂,硫酸亞鐵,瓊脂2g,水100ml。先把淀粉放在燒杯里,用5ml水調成糊狀后,倒入95ml水,攪勻后加入其他藥品,使它溶解。在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解后,補足失水。調整pH值到,分裝后滅菌,備用。面粉瓊脂培養基面粉60g,瓊脂20g,水1000ml把面粉用水調成糊狀,加水到500ml,放在文火上煮30分鐘。另取500ml水,放入瓊脂,加熱煮沸到溶解后,把兩液調勻,補充水分,調整pH值到,分裝,滅菌,備用。微藻培養基BG-11培養基NaNO3,K2HPO4·,MgSO4·,CaCl2·CitricAcid(檸檬酸),Ferricammoniumcitrate(檸檬酸鐵銨,EDTA(dinatrium-salt),Na2CO3,A5+Cosolution*(A5溶液1000×)1mlDistilledWater。記錄其來源。培養基的制備記錄每次制備培養基均應有記錄。
且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、***、無機物等,這些物質對促進細胞生長或***生長活性是達到生理平衡的。血清主要作用1.提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。2.提供***和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質***(氫化可的松、**)、類固醇***(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3.提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及***等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。4.提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。5.對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發現的,則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被***用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用。pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應復制一份。上海生態即用型培養基地方
因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外。浦東新區智能即用型培養基以客為尊
培養基化學分類編輯語音培養基天然培養基天然培養基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養基。例如。牛肉膏蛋白胨培養基、麥芽汁培養基和LB培養基等。常用的天然有機營養物質包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養基成本較低,除在實驗室經常使用外,也適于用來進行工業上大規模的微生物發酵生產。固體培養基培養基組合培養基合成培養基是根據天然培養基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計而配制的培養基。例如,高氏1號培養基和查氏培養基等。合成培養基有一定的配方,配制合成培養基時重復性強,但與天然培養基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,一般適于在實驗室用來進行有關微生物營養需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。[2]培養基半組合培養基指一類主要以化學試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養基。例如,馬鈴薯蔗糖培養基。培養基物理分類編輯語音培養基液體培養基80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養成分的培養基。培養基固體培養基一類配制成的固體狀態的基質。根據性質又分為固化培養基、非可逆性固化培養基、天然固態培養基、濾膜。浦東新區智能即用型培養基以客為尊
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