用于培養霉菌的加入蔗糖,用于培養酵母菌的加入葡萄糖),補足水分,分裝,滅菌,備用。把這培養基的pH值調到,配方中的糖,如用葡萄糖還可用來培養放線菌和芽孢桿菌。豆芽汁培養基黃豆芽100g,瓊脂15g,葡萄糖20g,水1000ml洗凈黃豆芽,加水煮沸30分鐘。用紗布過濾,濾液中加入瓊脂,加熱溶解后放入糖,攪拌使它溶解,補足水分到1000ml,分裝,滅菌,備用。把這培養基的pH值調到,可用來培養細菌和放線菌。豌豆瓊脂培養基豌豆80粒,瓊脂5g,水200ml瓊脂取80粒干豌豆加水,煮沸1小時,用紗布過濾后,在濾液中加入瓊脂,煮沸到溶解,分裝,滅菌,備用。食用菌菌種培養基馬鈴薯-蔗糖-瓊脂培養基20%馬鈴薯煮汁1000ml,蔗糖20g,瓊脂18g把馬鈴薯洗凈去皮后,切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200g,加水1000ml,煮沸20分鐘后,過濾。在濾汁中補足水分到1000ml,即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,補足水分,分裝,滅菌,備用。使用該培養基對pH值要求不嚴格,可以不測定。綜合馬鈴薯培養基20%馬鈴薯煮汁1000ml,磷酸二氫鉀3g,硫酸鎂,葡萄糖20g,維生素10mg,瓊脂18g先配制20%馬鈴薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各種組分,加熱溶解后補足水分。無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。閔行區質量臨床微生物檢驗培養基建筑
對培養基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養基用,℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,長時間高溫會使某些不耐熱物質遭到破壞,如使糖類物質形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養基常在,℃15-30分鐘進行滅菌,某些對糖類要求較高的培養基,可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合;長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產生沉淀,因此,在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養基時,常需在培養基中加入少量螯合劑,避免培養基中產生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸(EDTA)。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養基pH會發生改變(一般使pH降低),可根據所培養微生物的要求,在培養基滅菌前后加以調整。在配制培養基過程中,泡沫的存在對滅菌處理極不利,因為泡沫中的空氣形成隔熱層,使泡沫中微生物難以被殺死。因而有時需要在培養基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產生,或適當提高滅菌溫度。普陀區現代臨床微生物檢驗培養基基地血清的質量標準血清質量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。
培養基制備基本方法編輯語音培養基配方的選定同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的加以選用,記錄其來源。培養基的制備記錄每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號。**終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。培養基成分的稱取培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,**好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側,每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。完全稱取完畢后,還應進行一次檢查。培養基各成份的混合和溶化培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。**好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用。
兼性厭氧微生物在F值為+,在+。F值與氧分壓和pH有關,也受某些微生物代謝產物的影響。在pH相對穩定的條件下,可通過增加通氣量(如振蕩培養、攪拌)提高培養基的氧分壓,或加入氧化劑,從而增加F值;在培養基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質可降低F值。5、原料來源的選擇在配制培養基時應盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養基成分,特別是在發酵工業中,培養基用量很大,利用低成本的原料更體現出其經濟價值。例如,在微生物單細胞蛋白的工業生產過程中,常常利用糖蜜(制糖工業中含有蔗糖的廢液)、乳清(乳制品工業中含有乳糖的廢液)、豆制品工業廢液及黑廢液(造紙工業中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿)等都可作為培養基的原料。再如,工業上的甲烷發酵主要利用廢水、廢渣作原料,而在我國農村,已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發酵生產甲烷作為燃料。另外,大量的農副產品或制品,如鼓皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白胨等都是常用的發酵工業原料。6、滅菌處理要獲得微生物純培養,必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養基而言,更是要進行嚴格的滅菌。證明所用牛血清中不含對所生產疫苗病毒的***物。
價格昂貴,是構成動物細胞培養對生產成本的主要部分之一。血清的質量標準血清質量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內,取材過程應嚴格按照操作規程執行,制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定。WHO公布的《用動物細胞體外培養生產生物制品規程》中的要求:1.牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當的監測系統。2.有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。3.證明所用牛血清中不含對所生產疫苗病毒的***物。4.血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。5.無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。6.對細胞有良好的支持繁殖作用。我國在對牛血清的質量2000年版《中國生物制品主要原輔料質控標準》中提出比較嚴格的標準要求。包括蛋白質含量,細菌、***、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內***,支持細胞增殖檢查。培養基培養基配制編輯語音一、配制用水培養基的大部分是水,所以水的質量直接影響培養基的質量。按Waymouth標準,水的電阻應為200萬歐姆,一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。并應具備適當的監測系統。長寧區推廣臨床微生物檢驗培養基銷售電話
1.牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。閔行區質量臨床微生物檢驗培養基建筑
且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、***、無機物等,這些物質對促進細胞生長或***生長活性是達到生理平衡的。血清主要作用1.提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。2.提供***和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質***(氫化可的松、**)、類固醇***(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3.提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及***等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。4.提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。5.對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發現的,則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被***用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用。閔行區質量臨床微生物檢驗培養基建筑
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