不能用手觸及已消毒器皿瓶口、瓶塞內部,吸管前部等所有可能與細胞接觸的部分,如已接觸,要用火焰燒灼消毒或取備品更換。開啟、關閉長有細胞的培養瓶時,火焰滅菌時間要短。防止因溫度過高燒死細胞。換液時傾倒廢液,瓶口不能接觸廢液缸,速度不能過快,防止廢液四濺。吹打細胞時,要注意邊角的細胞是否吹打下來。手或相對較臟的物品不能經過開放的瓶口上,即不可以在開放容器上方操作。每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染。注意自身的安全,對于來自人源性或病毒的細胞株應特別小心。操作過程中,應避免引起氣溶膠的產生,小心有毒性試劑例如DMSO,并避免尖銳物品傷人等。從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養細胞都可以用于凍存,但比較好為對數生長期細胞。在凍存前比較好換一次培養液。將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作,以免。凍存和復蘇比較好用新配制的培養液。 上海中喬新舟 原代肝細胞值得信賴。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!青海馬肝細胞原代肝細胞屬于什么細胞
隨著各型肝炎、肝硬化、肝等慢性肝病的發病率日益升高,體外培養的肝細胞也被普遍地用千肝病基礎研究中。盡管細胞培養技術不斷改進和成熟,國內外也先后建立了多株人肝細胞系,但體外分離和培養人正常肝細胞仍是非常有價值的研究材料。一材料與設備1.設備與器材超凈工作臺、離心機、CO2培養箱、-70℃冰箱、-20℃冰箱。2.無菌材料大培養皿、青霉素小瓶、50ml離心管、刻度吸管、彎頭吸管、T25培養瓶、手術剪、刀、鏤、細胞篩(100目)、消毒用乙醇棉球、流產胚胎、高糖DMEM培養液、胎牛血清、青/鏈霉素、D-Hanks溶液、0.25%胰蛋白酶/0.03%EDTA消化液。河南小鼠肝細胞 CD-1原代肝細胞種類原代肝細胞的定制尺寸。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
肝臟,是脊椎動物體內以代謝功能為主的,也是人的五臟之一。肝臟能促使一些有毒物質的改進,再排泄體外,從而起到作用。它是人體內的一座“化工廠”,是新陳代謝的重要。但同時,肝臟也十分脆弱,過度的酒精、藥物帶來的毒性也會對其造成不可逆的損傷。因此無論在疾病研究、藥物研發,或是環境安全等的研究中,對肝臟進行研究都至關重要。在這些研究中使用原代肝細胞,往往是比較好的選擇。因為原代細胞離體時間短,保持了其在體內的生物學特性,更接近體內環境的研究模型。同時也無須擔心動物實驗的倫理問題,亦可減少動物實驗所需要的的成本開支,實現了減少(Reduction)、替代(Replacement)、優化(Refinement)的3R倫理原則。
原代肝細胞的分離與培養采用Seglen門靜脈兩步灌流法及其改良方法分離小鼠原代肝細胞,多次低速離心純化肝實質細胞,采用單層膠原培養法進行體外培養[15-18]。具體操作:雄性C57BL/6J小鼠腹腔注射1%鈉(50mg/kg)麻醉后,浸泡于75%乙醇中消毒1~2min,在無菌條件下(超凈工作臺中)剪開腹部并暴露下腔靜脈與肝門靜脈。將靜脈留置針插入下腔靜脈后,迅速剪斷肝門靜脈。用無鈣無鎂的PBS緩沖液(含EDTA)灌流約50mL,在整個過程中,灌流液的灌流速度保持在7~8mL/min,溫度保持在37℃左右。待肝臟血液排出,肝臟變白后,用IV型膠原酶緩沖液()進行原位消化,灌注膠原酶時,先用鑷子夾閉肝門靜脈,待肝臟膨起后停頓30s再松開鑷子,反復多次,共灌流約10mL,溫度保持在37℃左右。灌流結束后,迅速將肝臟從體腔中取出并轉移到含EDTA的預冷PBS緩沖液中洗去血污、摘除膽囊,隨后轉移至含10%胎牛血清的DMEM培養基的培養皿中。用鑷子輕輕地撕開包膜,夾住肝蒂輕輕晃動使肝細胞充分釋放,收集肝細胞懸液,用200目細胞篩網過濾。濾液在4℃、500r/min低速離心3min,棄上清。細胞沉淀用4~5mL的PBS緩沖液重懸后在4℃、500r/min離心1min,重復清洗3次后,使用臺盼藍檢測細胞活率和產出。 原代肝細胞哪個性價比高?上海中喬新舟告訴您。
肝細胞作為細胞移植慢性肝衰竭的種子細胞以及作為藥物篩選的靶細胞,制備和培養大規模的、高活力的肝細胞是這些研究的基本環節。因此肝細胞的分離和培養技術正日益受到人們關注,成為當前研究的熱點。目前肝細胞的分離方法有機械分離法、螯合法和酶消化法等。機械法操作簡單,但分離獲得的肝細胞數量少、活性差。howard創建了膠原酶灌流法,seglen進一步將這種方法發展為兩步灌流法。膠原酶灌流法得到的肝細胞數量和活性都得到提高,灌流法廣泛應用于大鼠、小鼠、犬和兔等動物。但此方法對肝組織塊的體積要求較大,不適用于手術切除的不規則小塊人肝組織,無法滿足基礎研究中對人肝細胞的需求。因此,急需建立一種簡單、高效的分離培養人原代肝細胞的技術。 原代肝細胞的市場價格。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!河南小鼠肝細胞 CD-1原代肝細胞種類
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藥物性肝損傷(DILI)是臨床常見的肝損傷類型,是嚴重的藥物不良反應之一。細胞死亡是DILI的重要特征,藥物可通過誘導內質網應激和死亡受體等方式凋亡通路,誘導肝細胞凋亡或壞死,誘發肝損傷。除凋亡和壞死外,DILI過程中還伴隨著自噬、焦亡和鐵死亡。自噬可以去除受損的蛋白質以及細胞器,是肝細胞存活的重要機制,但也可能誘導肝細胞死亡。焦亡和鐵死亡是近發現的細胞死亡方式,其在DILI中的作用尚未完全闡明。阻斷肝細胞死亡通路,是DILI的重要手段。水飛薊素、柚皮素、人參皂苷等可以抑制肝細胞死亡通路,是DILI的潛在藥。針對不同細胞死亡方式的機制和特點,研究改善肝細胞死亡的藥物對DILI具有重要意義。總結了DILI中肝細胞死亡的機制,并論述了潛在的藥物。 青海馬肝細胞原代肝細胞屬于什么細胞
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1、原代細胞:ScienCell(中國區正規一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養基。
3、細胞培養試劑:胎牛血清、原代細胞轉染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養基。
5、自研產品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產品。
6、技術服務:綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩轉株的構建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。