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專利申請利用分離培養人尿液來源細胞并收集培養基來進行體外培養，直接把外泌體從尿液中沉降下來，無須分離培養人尿液來源細胞并收集培養基。人尿液來源細胞的外泌體的獲取方法，是首先分離培養人尿液來源細胞并收集培養基，將人尿液來源細胞的培養基通過0.22微米濾膜過濾，以去除大的細胞殘片以及其它雜質；然后離心除去細胞器，留取上清；再使用可截留100KD分子量的膜，通過離心截留上清中的外泌體，截留完成后，使用PBS對膜進行洗脫即得到外泌體濃縮液。外泌體提取：可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌體。天津外泌體提取試劑推薦廠家

有研究發現，NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽性的占80%，而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽性的只占2%，因而認為外泌體的EGFR蛋白可以用作NSCLC與慢性肺炎鑒別診斷的生物標志物。Park等通過Sys-BodyFlu-id數據庫分析發現153種特異性胸腔積液外泌體蛋白質，進一步的Westernblotting分析顯示多種特異性胸腔積液外泌體蛋白參與EGFR信號傳導途徑以促進一些病癥的發生的發展，因此外泌體蛋白可能作為肺病診斷篩查的生物學標記物。外泌體相關蛋白質與肺病的診斷：近年來眾多文獻報道，肺病細胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質并促進肺病的發生的發展，是早期診斷肺病的有效途徑。蕪湖外泌體提取試劑廠家現貨逐漸取代超速離心法并推廣開來。有些試劑盒操作簡便，不用超速離心。

外泌體的提取、分離方法：超高速離心法。常用的是超高速離心法，該方法是被譽為分離外泌體的“金標準”。該方法利用離心力從細胞培養液或生物流體獲得外泌體，經過400×g、2000×g、10000×g的低速離心，除去細胞及大的細胞分泌物；較后超高速100000×g離心得到外泌體[12]。超高速離心因操作簡單，不需要復雜的技術支持，并且成本相對較低而被普遍使用。但是該方法耗時、產率低，得到的外泌體的數量和質量很大程度上受轉子的類型、轉子沉降角度等因素影響，其中較主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體，但也會有其他的囊泡、蛋白質或蛋白和RNA的聚集體。

外泌體在肺病治病中的作用：有研究發現，使用外泌體運載紫杉醇（PTX）可顯著提高病細胞對PTX的吸收，將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細胞毒性，Exo-PTX能顯著壓制肺病的發展。Aqil等在進行裸鼠實驗時發現，加載至外泌體中的雷公藤紅素（Exo-CEL）比普通的CEL有更強的抗一些病癥功效，且在小鼠中未發現明顯全身性或系統性毒性，由此可以證明，外泌體制劑可以有效增強CEL功效并降低與劑量有關的毒性。到目前為止，外泌體在肺病治病方面的研究主要集中于免疫壓制，有效的外泌體藥物遞送平臺的搭建以及外泌體相關的潛在治病靶點的探索。已有的研究表明外泌體在肺病治病領域有著廣闊的前景，期待外泌體在肺病治病領域早日得到突破，造福更多的患者。用無菌針管吸取上層含有外泌體的液體，置于80℃儲存備用。

外泌體（Exosomes）是細胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結構和茶托狀形態，含有豐富的內含物（包括核酸、蛋白和脂質等），參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養上清以及各種體液中，包括血液、唾液、尿液、乳汁等，同時也存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進行消化，經水浴、反復輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結束。隨后加入培養基于消化液中，混勻，置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程，包括除雜、濾膜過濾、超離等。較后用PBS重懸外泌體，用重懸后的外泌體進行下面的透射電鏡（TEM）、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定。將人尿液來源細胞的培養基通過0.22微米濾膜過濾，以去除大的細胞殘片以及其它雜質。重慶正規外泌體提取試劑哪家好

外泌體的提取、分離方法：免疫親和層析法。天津外泌體提取試劑推薦廠家

人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合，進而靶細胞細胞內的信號通路。二是在細胞外基質中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合，從而細胞內的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質、mRNA以及microRNA天津外泌體提取試劑推薦廠家