傳統(tǒng)的寬場(chǎng)熒光顯微鏡由于光散射的影響,只能夠?qū)Υ竽X淺層的神經(jīng)元或在離體組織上進(jìn)行成像,共聚焦顯微鏡由于光損傷較大,一般也只用于離體鈣成像。隨著熒光顯微鏡技術(shù)的迅速發(fā)展,在體鈣成像技術(shù)得到了蓬勃發(fā)展。雙光子熒光顯微鏡能夠在進(jìn)行活動(dòng)動(dòng)物成像的時(shí)候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信...
利用鈣成像技術(shù)記錄大腦活動(dòng),隨著功能光學(xué)成像技術(shù)的發(fā)展,神經(jīng)學(xué)家們已經(jīng)可以研究腦區(qū)和神經(jīng)元內(nèi)部的工作情況。功能鈣成像技術(shù)就是其中之一,其主要原理是將外源性熒光信號(hào)和生理現(xiàn)象耦合起來(lái)——通過(guò)熒光染料信號(hào)的改變反映細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度,以此細(xì)胞的功能狀態(tài)。目前它被...
鈣離子在很多生理活動(dòng)中都發(fā)揮著重要作用,除了在肌肉細(xì)胞收縮中扮演著重要角色,鈣離子也是神經(jīng)元活動(dòng)的重要“風(fēng)向標(biāo)”之一:當(dāng)神經(jīng)元膜電位發(fā)生去極化,產(chǎn)生的動(dòng)作電位傳導(dǎo)到神經(jīng)元軸突末梢時(shí),細(xì)胞膜上的電壓門控鈣離子通道打開,大量鈣離子內(nèi)流,包含神經(jīng)遞質(zhì)的囊泡由突觸前膜...
眾所周知,只有游離鈣才具有生物學(xué)活性,而細(xì)胞質(zhì)內(nèi)鈣離子濃度由鈣離子的內(nèi)外流平衡所決定,同時(shí)也受鈣結(jié)合蛋白的影響。細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流的方式有很多種,其中包括電壓門控鈣離子通道、離子型谷氨酰胺受體、煙堿型膽堿能受體(nAChR)和瞬時(shí)受體電位C型通道(TRPC)等。...
在神經(jīng)系統(tǒng)研究中,我們常使用鈣指示劑表征鈣離子濃度變化,以反映神經(jīng)元的活動(dòng)。常見的鈣成像方法有雙光子熒光成像和單光子熒光成像兩種,其中后者是研究腦神經(jīng)活動(dòng)的常用方法。但與雙光子成像相比,單光子成像更易受到來(lái)自神經(jīng)元的高水平串?dāng)_,導(dǎo)致信噪比降低。不僅如此,采集活...
無(wú)創(chuàng)睡眠監(jiān)視系統(tǒng)是如何工作的呢?首先,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被放置在一個(gè)特制的實(shí)驗(yàn)籠內(nèi),這個(gè)籠子配備了高精度的傳感器,能夠精確地監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的各種生理指標(biāo),包括心率、呼吸率、體溫等。這些傳感器將收集的數(shù)據(jù)傳輸?shù)竭B接的電腦上,通過(guò)特定的軟件進(jìn)行分析和處理。這個(gè)系統(tǒng)可以實(shí)時(shí)顯示...
因斯蔻浦,一個(gè)在生物科技領(lǐng)域創(chuàng)新領(lǐng)的公司,近日推出了一款無(wú)創(chuàng)睡眠監(jiān)視系統(tǒng),徹底改變了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)的方式。這款系統(tǒng)主要針對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,無(wú)需進(jìn)行任何手術(shù)操作,只需將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物直接放置在實(shí)驗(yàn)籠內(nèi),儀器便能自動(dòng)開始監(jiān)測(cè)。這項(xiàng)技術(shù)的推出,不僅減輕了科研人員的負(fù)擔(dān),也極大地減...
麻省理工學(xué)院和波士頓大學(xué)的研究人員近研究使用一種熒光探針,能夠在大腦細(xì)胞處于電活動(dòng)狀態(tài)時(shí)點(diǎn)亮,可以立即對(duì)小鼠大腦中多個(gè)神經(jīng)元的活動(dòng)進(jìn)行成像。麻省理工學(xué)院的腦科學(xué)和認(rèn)知科學(xué)神經(jīng)技術(shù)教授、兼生物工程學(xué)教授EdwardBoyden表示,只需要使用簡(jiǎn)單的光學(xué)顯微鏡,即...
鈣成像的熒光指示劑鈣成像的熒光探針一般均為Ca2螯合劑EGTA,APTRA,BAPTA的衍生物,它們可以結(jié)合鈣離子從而顯示一個(gè)光譜響應(yīng),使研究者可以用熒光顯微鏡來(lái)觀察細(xì)胞內(nèi)的自由鈣的濃度。熒光顯微鏡可以使用普通的倒置熒光顯微鏡來(lái)進(jìn)行鈣信號(hào)的測(cè)定和成像。并可結(jié)合...
睡眠百分比(白天和黑夜選項(xiàng))滑動(dòng)間隔的覺醒百分比超過(guò)24小時(shí)的睡眠百分比繪制睡眠/覺醒決策直方圖睡眠時(shí)長(zhǎng)直方圖(默認(rèn)或用戶定義)睡眠時(shí)長(zhǎng)直方圖(白天到晚上)輕松將文件導(dǎo)出到Excel進(jìn)行離線分析。,用戶可以選擇在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的任何時(shí)候放大和覆蓋睡眠覺醒圖上的原始...
SignalSolutions分析軟件SleepStatsDataExplorer使用統(tǒng)計(jì)方法將從壓電傳感器收集的數(shù)據(jù)分為2種狀態(tài),即“睡眠”和“覺醒”。使用從數(shù)據(jù)中提取的一組特征將其分為“睡眠”或“覺醒”來(lái)完成分類。通過(guò)對(duì)小鼠進(jìn)行同步腦電圖(EEG)和無(wú)創(chuàng)睡...
可見光激發(fā)Ca2+熒光探針與紫外光激發(fā)探針相比,可見光激發(fā)Ca2+探針具有更強(qiáng)的染料吸收性能,對(duì)Ca2+變化水平檢測(cè)敏感度也更高,能夠降低對(duì)活細(xì)胞的光毒性和樣品自發(fā)熒光以及光散射的干擾,且無(wú)光譜偏移。常使用的可見光激發(fā)Ca2+熒光探針有Fluo-3,F(xiàn)luo-...
因斯蔻浦,一個(gè)在生物科技領(lǐng)域創(chuàng)新領(lǐng)的公司,近日推出了一款無(wú)創(chuàng)睡眠監(jiān)視系統(tǒng),徹底改變了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)的方式。這款系統(tǒng)主要針對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,無(wú)需進(jìn)行任何手術(shù)操作,只需將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物直接放置在實(shí)驗(yàn)籠內(nèi),儀器便能自動(dòng)開始監(jiān)測(cè)。這項(xiàng)技術(shù)的推出,不僅減輕了科研人員的負(fù)擔(dān),也極大地減...
解決鈣成像裝置對(duì)核磁成像的干擾:考慮到金屬對(duì)核磁成像的影響,研究人員在核磁共振成像的模塊上裝上了鈣成像模塊,該成像模塊所有的金屬元件全部被更換為非導(dǎo)電塑料。考慮到磁場(chǎng)對(duì)光纖記錄系統(tǒng)的干擾,減少鈣信號(hào)的噪音,將相干光纖激光器與核磁共振放置相鄰不同的房間。解決鈣成...
隨著功能光學(xué)成像技術(shù)的發(fā)展,神經(jīng)學(xué)家們已經(jīng)可以研究腦區(qū)和神經(jīng)元內(nèi)部的工作情況。功能鈣成像技術(shù)就是其中之一,它的主要原理是將外源性熒光信號(hào)和生理現(xiàn)象耦合起來(lái)——通過(guò)熒光染料信號(hào)的改變反映細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度,通過(guò)這個(gè)變化來(lái)daibiao細(xì)胞的功能狀態(tài)。目前這種技...
無(wú)創(chuàng)性:PiezoSleep嚙齒動(dòng)物行為跟蹤系統(tǒng)將無(wú)創(chuàng)壓電傳感技術(shù)應(yīng)用于動(dòng)物籠子,只需按一下按鈕即可自動(dòng)跟蹤睡眠和醒來(lái)。自動(dòng)化:數(shù)據(jù)采集軟件自動(dòng)對(duì)睡眠和覺醒進(jìn)行評(píng)分,數(shù)據(jù)采集完成后即可對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析,無(wú)需人工干預(yù),評(píng)分結(jié)果具有一致性。長(zhǎng)時(shí)間:可實(shí)現(xiàn)了動(dòng)物的終身...
目前有三種在神經(jīng)元上填充鈣離子指示劑的方法,且都可以用于體內(nèi)和體外研究。第一種方法是利用玻璃吸管將膜滲透性鹽或葡聚糖形式的指示劑注入單個(gè)神經(jīng)元中。此方法方便實(shí)驗(yàn)者控制單個(gè)神經(jīng)元內(nèi)的鈣離子指示劑濃度且信噪比較高。第二種是利用“批量加載”的方法將鈣離子指示劑染料負(fù)...
單光子顯微技術(shù)是相對(duì)成熟的熒光顯微技術(shù),但由于單光子顯微技術(shù)使用的激發(fā)光波長(zhǎng)較短,成像深度比較有限;能量比較大,會(huì)造成對(duì)熒光物質(zhì)的漂白,光毒性嚴(yán)重。激光共焦掃描顯微鏡由于共焦顯微鏡的孔徑很小,實(shí)現(xiàn)樣本三維成像要逐點(diǎn)掃描,成像速度慢,對(duì)樣本損害大,很難用于長(zhǎng)時(shí)間...
使用MPM對(duì)神經(jīng)元進(jìn)行鈣成像時(shí),通過(guò)隨機(jī)訪問掃描—即激光束在整個(gè)視場(chǎng)上的任意選定點(diǎn)上進(jìn)行快速掃描—可以只掃描感興趣的神經(jīng)元,這樣不僅避免掃描到任何未標(biāo)記的神經(jīng)纖維,還可以優(yōu)化激光束的掃描時(shí)間。隨機(jī)訪問掃描可以通過(guò)聲光偏轉(zhuǎn)器(AOD)來(lái)實(shí)現(xiàn),其原理是將具有一個(gè)射...
Anderson研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室雄性小鼠對(duì)雌性和雄性的攀爬行為可以通過(guò)是否存在超聲發(fā)聲(USV)來(lái)區(qū)分。這些和更多的行為數(shù)據(jù)表明,大多數(shù)雄性主導(dǎo)的攀爬是攻擊性的,盡管在極少數(shù)情況下可能是性行為。研究人員調(diào)查了USV+和USV-攀爬是否使用相同或不同的下丘腦神...
多種鈣離子指示劑和鈣成像手段的存在使研究人員能夠根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行選擇。同樣,選擇合適的檢測(cè)設(shè)備也是至關(guān)重要的。對(duì)于使用CCD/sCMOS相機(jī)的成像系統(tǒng)來(lái)說(shuō),有兩個(gè)要求是很基本的:采集速度:根據(jù)不同的應(yīng)用所需的相機(jī)幀速也不同,對(duì)于神經(jīng)細(xì)胞來(lái)說(shuō),一般要求相機(jī)...
霍華德休斯頓醫(yī)學(xué)研究所(HHMI)ScottSternson課題組研究了影響這種源源不斷的食欲的神經(jīng)機(jī)制。他們通過(guò)使用Inscopix小顯微鏡觀察小鼠腦干區(qū)域的神經(jīng)元,發(fā)現(xiàn)貪念美食的小鼠可能是因?yàn)樘厥獾拇竽X區(qū)域?qū)γ朗澈湍滩璞绕渌∈蟾用舾小1灸軙?huì)驅(qū)使我們?cè)诟?..
鈣離子在很多生理活動(dòng)中都發(fā)揮著重要作用,除了在肌肉細(xì)胞收縮中扮演著重要的角色,鈣離子也是神經(jīng)元活動(dòng)的重要“風(fēng)向標(biāo)”之一:當(dāng)神經(jīng)元膜電位發(fā)生去極化,產(chǎn)生的動(dòng)作電位傳導(dǎo)到神經(jīng)元軸突末梢時(shí),細(xì)胞膜上的電壓門控鈣離子通道打開,大量鈣離子內(nèi)流,包含神經(jīng)遞質(zhì)的囊泡由突觸前...
隨著功能光學(xué)成像技術(shù)的發(fā)展,神經(jīng)學(xué)家們已經(jīng)可以研究腦區(qū)和神經(jīng)元內(nèi)部的工作情況。功能鈣成像技術(shù)就是其中之一,其主要原理是將外源性熒光信號(hào)和生理現(xiàn)象耦合起來(lái)——通過(guò)熒光染料信號(hào)的改變反映細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度,以此表示細(xì)胞的功能狀態(tài)。目前它被廣泛應(yīng)用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)一群相...
鈣成像的熒光指示劑鈣成像的熒光探針一般均為Ca2螯合劑EGTA,APTRA,BAPTA的衍生物,它們可以結(jié)合鈣離子從而顯示一個(gè)光譜響應(yīng),使研究者可以用熒光顯微鏡來(lái)觀察細(xì)胞內(nèi)的自由鈣的濃度。熒光顯微鏡可以使用普通的倒置熒光顯微鏡來(lái)進(jìn)行鈣信號(hào)的測(cè)定和成像。并可結(jié)合...
霍華德休斯頓醫(yī)學(xué)研究所(HHMI)ScottSternson課題組研究了影響這種源源不斷的食欲的神經(jīng)機(jī)制。他們通過(guò)使用Inscopix小顯微鏡觀察小鼠腦干區(qū)域的神經(jīng)元,發(fā)現(xiàn)貪念美食的小鼠可能是因?yàn)樘厥獾拇竽X區(qū)域?qū)γ朗澈湍滩璞绕渌∈蟾用舾小1灸軙?huì)驅(qū)使我們?cè)诟?..
傳統(tǒng)的寬場(chǎng)熒光顯微鏡由于光散射的影響,只能夠?qū)Υ竽X淺層的神經(jīng)元或在離體組織上進(jìn)行成像,共聚焦顯微鏡由于光損傷較大,一般也只用于離體鈣成像。隨著熒光顯微鏡技術(shù)的迅速發(fā)展,在體鈣成像技術(shù)得到了蓬勃發(fā)展。雙光子熒光顯微鏡能夠在進(jìn)行在體成像的時(shí)候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信噪比...
隨著技術(shù)的發(fā)展,雙光子顯微鏡的性能得到不斷地優(yōu)化,結(jié)合它的特點(diǎn),大致可以分成深和活兩方面的提升。要想讓激發(fā)激光進(jìn)入更深的層面,大致可從兩個(gè)方面入手,裝置優(yōu)化與標(biāo)本改造。關(guān)于裝置優(yōu)化,我們可以把激光束變得更細(xì),使能量更加集中,就能讓激光穿透更深。關(guān)于標(biāo)本,其中影...
從雙光子到三光子:科學(xué)家正在從雙光子轉(zhuǎn)向三光子顯微鏡。1996年,ChrisXu在康奈爾大學(xué)(Denk同導(dǎo)師實(shí)驗(yàn)室)讀博期間發(fā)明了三光子顯微鏡,如果雙光子吸收可行,那么三光子看起來(lái)也是自然的發(fā)展方向。三光子成像使用更長(zhǎng)的波長(zhǎng),大約在1.3和1.7微米,其成像深...
在國(guó)家自然科學(xué)基金委國(guó)家重大科研儀器研制專項(xiàng)《超高時(shí)空分辨微型化雙光子在體顯微成像系統(tǒng)》的支持下,北京大學(xué)分子醫(yī)學(xué)研究所、信息科學(xué)技術(shù)學(xué)院、動(dòng)態(tài)成像中心、生命科學(xué)學(xué)院、工學(xué)院聯(lián)合中國(guó)人民醫(yī)學(xué)科學(xué)院組成跨學(xué)科團(tuán)隊(duì),歷經(jīng)三年多的協(xié)同奮戰(zhàn),成功研制新一代高速分辨微型...