陽離子脂質體合成中常用的分子是中性脂質二油基磷脂酰乙醇胺(DOPE)。DOPE的作用是促進膜融合，并有助于質膜或核內體的不穩定。此外，由于陽離子脂質相互排斥，因此需要DOPE等輔助脂質來穩定陽離子脂質體（CLs）懸浮液，并抵消其他載體如聚乙烯亞胺(PEI)和樹狀大分子中存在的陰離子糖胺聚糖的抗轉染作用。沒有中性脂質的脂質體具有較低的轉染率，盡管情況并非總是如此。不同的轉染率可能是由用于配制脂質體的陽離子:中性脂質的不同比例引起的。如上所述，CLs介導的核酸轉移的成功取決于許多因素，這些因素可能解釋了脂質體(脂質體介導的轉染)的內在變異性，特別是在體內。評估轉染效率至關重要，特別是在需要高轉染效率以保證特定下游靶標轉錄后調控的功能研究中。吉林轉染試劑定制
納米顆粒，由于其在DNA轉運到細胞中的保護能力，在不久的將來可以用作轉基因的非病毒載體。通過將納米粒子與許多不同的配體和化合物連接來修飾納米粒子，有助于改善它們在細胞內的運輸。將納米顆粒靶向到細胞內的特定位置，配子和胚胎，可以通過磁轉染來實現。盡管與市售的用于體外培養細胞的轉染試劑相比，使用納米顆粒轉染具有相當的效率和更低的細胞毒性，但仍需要證明以這種方式傳遞DNA會導致體內相似水平的基因表達，特別是考慮到該技術可能導致副作用。新疆長沙轉染試劑轉染是將外源核酸送入細胞的過程，其目的是使外源基因編碼的蛋白能夠在細胞中表達。
小RNA和質粒DNA的共轉染可用于評估轉染效率。這可以通過引入含有熒光素酶報告基因的質粒來實現，其中的3'UTR可以被特定的小RNA(如miRNA)識別，然后允許小RNA結合以抑制熒光素酶的表達。另一方面，在RNA干擾(RNAi)研究中，小RNA和質粒DNA的共轉染也是必不可少的，以確定siRNA等特定小RNA對宿主細胞中特定基因表達的調節作用。小的非編碼RNA，如siRNA，以其表觀遺傳調控能力而聞名，更具體地說，是轉錄后對特定基因表達的調控。siRNA模擬物和攜帶與熒光素酶報告系統相關的特定基因的質粒DNA可以同時共轉染到靶細胞中。siRNA模擬物成功敲低特定基因表達將導致熒光素酶活性***降低。共轉染還可能涉及不同的小分子如miRNAs，這有助于研究小RNA對靶宿主細胞的影響。例如，如果引入miRNA模擬物可以影響特定細胞類型中特定下游基因的表達，那么預計將其抑制劑序列同時轉染到同一細胞中會降低單獨miRNA模擬物序列發揮的轉錄后調節作用。與單一核酸類型的轉染相比，涉及將多個核酸轉移到同一細胞中的共轉染通常更多挑戰性更大，因為并非所有核酸類型都能有效轉移，這可能取決于轉染方法和所涉及的細胞類型。
基于非病毒的轉染方法可以進一步分為物理/機械方法和化學方法。常用的物理/機械轉染方法包括電穿孔、聲孔、磁***、基因顯微注射和激光照射。電穿孔是一種常用的物理轉染方法，利用電壓瞬間增加細胞膜通透性，允許外來核酸進入。這種方法通常用于轉染原代細胞、干細胞和B細胞系等難以轉染的細胞。然而，使用高壓可能導致細胞壞死、凋亡和長久性細胞損傷。超聲輔助轉染或超聲穿孔涉及使用微泡技術在細胞膜上制造孔，以減輕遺傳物質的轉移，而激光照射輔助轉染使用激光束在質膜上制造小孔，允許外來遺傳物質進入。與電穿孔一樣，超聲穿孔和激光輔助轉染也有破壞細胞膜和不可逆細胞死亡的風險。相比之下，磁輔助轉染，或使用磁力來幫助轉移外來遺傳物質的磁轉染，似乎對生物的破壞性較盡管效率較低，但對宿主細胞的破壞較小。另一方面，基因顯微注射涉及使用特定的針刺穿細胞，將所需的核酸注射到宿主細胞的細胞核中。然而，這項技術需要經過專門訓練的人員或機器人系統，他們可以高精度地執行程序，以防止細胞損傷，因此在基因***等臨床應用中具有重要價值。與物理或機械轉染方法相比，化學轉染涉及使用專門設計的化學品或化合物來幫助將外源核酸轉移到宿主細胞中。與DNA轉染類似，RNA可以通過基于RNA的病毒或非病毒載體導入真核細胞。
PHP是由天然來源的羥基脯氨酸(如膠原蛋白、明膠和其他蛋白質)制成的，是***個用作基因載體的聚酯。在生理環境中，PHP可以在不到兩個小時的時間內失去其初始分子量的50%。然而，PHP完全分解為其等效單體需要三個月的時間，分解產物是單體羥脯氨酸。雖然PHP酯在溶液中單獨存在時降解很快，但與DNA絡合時更穩定。將PHP酯/pSV-gal復合物轉染CPAE細胞，測定PHP酯作為基因傳遞載體的活性。由于聚L-賴氨酸是**常用的基因轉運聚合物，PHP酯的轉染效率與聚L-賴氨酸相當。轉染效果隨著PHP酯濃度高于DNA濃度而增加。PHP酯轉染細胞的能力不受FBS存在的影響。結果表明，PHP酯是一種潛在的基因載體。在腺病毒載體或脂質體的全身遞送后，轉基因表達相對短暫。山西廣州轉染試劑
常用的物理/機械轉染方法包括電穿孔、聲孔、基因顯微注射和激光照射。吉林轉染試劑定制
不同種類的納米顆粒轉染細胞系后，產生不同的效率、毒性和組織特異性。這些大量的測試表明，納米顆粒作為載體的效率與普通的非病毒轉染方法相當。Tabatt等人所做的研究比較了使用脂質體、陽離子固體li-pid納米顆粒和兩種商用轉染劑對COS-1細胞系(非洲綠猴腎成纖維細胞樣細胞)使用四種不同的轉染介質所取得的轉染效果。固體脂質na-noparticles轉染組和溶酶體(均由DOTAP -N -(1-(2,3-二聚乙氧基)丙基)-N,N,N-三甲基硫酸銨)轉染組的熒光素酶基因表達效率沒有統計學上的***差異，在每種轉染介質中保持相同水平。然而，獲得的轉染效率低于使用商業轉染劑EscortTM 的效率，該轉染劑由DOPE(1,2-二-(順式-9-十八烷基)- n-甘油-3-磷酸乙醇胺)組成。研究人員通過在HepG2細胞(人肝細胞肝*細胞系)上使用固體脂質納米顆粒，實現了與市買的lipo-fectamine相同的綠色熒光蛋白和熒光素酶蛋白表達水平。吉林轉染試劑定制