單分子檢測數字ELISA穩定性

參考原理：血液中單個蛋白質分子的檢測有助于識別許多新的診斷性蛋白質標記物。我們報告了一種同時檢測數百至數千個單獨蛋白質分子的方法，該方法能夠檢測到非常低濃度的蛋白質。蛋白質被捕獲在顯微珠上，并用酶標記，每個顯微珠上有一個或零個酶標記的蛋白質。通過將這些顯微珠分離成50飛米的陣列反應室，單個蛋白質可以通過熒光想象檢測到。通過單化這些陣列中的分子，~10-20種酶可以在100μL（~10?19M）中檢測到。單個基于酶標記的分子酶聯免疫吸附試驗（數字ELISA)能夠檢測血清中臨床相關的蛋白質，其濃度（<10?15M）遠低于傳統ELISA3-5。數字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除術的患者血清中檢測到前列腺特異性抗原，比較低至14fmol/mL（0.4fmol）。

7）數字化高敏ELISA芯片，低成本、便捷、快速進行微量樣本的檢測；單分子檢測數字ELISA穩定性

芯棄疾JX-8B數字ELISA  具有超敏的優點：
檢測方法為陣列成像。陣列成像涉及對陣列中的每個孔進行檢測以確定是否存在微球并判斷微球是否具有酶活性。為此，開發了一種圖像分析軟件，該軟件首先創建一個陣列的“掩模”，以定義孔定位和邊界進行檢測。然后將孔掩模應用于陣列的熒光圖像，以確定孔內微球和酶的存在。對于陣列的熒光圖像，當進行多重檢測時，會生成微球群體或微球亞群的熒光強度直方圖。直方圖中的峰值自動識別并用于確定微球群體。單分子檢測數字ELISA穩定性芯棄疾JX-8B數字ELISA，微量檢測，使用微量樣本就能測試；

抗體篩選芯片的高效正交配對方案：抗體篩選芯片通過預埋式微陣列設計，在單通道內集成3×7或4×5抗體點陣（直徑200微米），支持18-21種抗體的同步測試。以IL-6抗體篩選為例，8種捕獲抗體與8種標記抗體在芯片上形成64種組合，通過熒光信號強度（信噪比>10）與交叉反應性分析（背景信號<5%），可在1小時內篩選出比較好配對組合（親和力KD≤1nM）。該技術耗樣量*需5μL，特別適用于珍稀樣本（如嬰幼兒血液或腦脊液）的高通量篩選。在新藥開發中，芯片可一次性測試數百種抗體對，結合機器學習算法（如隨機森林模型），預測候選抗體的特異性與穩定性，將傳統數周的篩選周期壓縮至24小時，研發成本降低70%。此外，芯片支持多條件優化（如pH梯度、離子強度），為診斷試劑盒的工藝開發提供全流程驗證平臺。

    創新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數字ELISA應用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測產品。循環血液轉化為~2×10?15M（或2飛摩爾，fM)；早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個病毒顆粒，相當于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M（50attomolar，aM)到15×10?15M（15fM）10.嘗試開發能夠測量這些蛋白質濃度的方法集中在蛋白質上的核酸標記復制，11,12或測量整體、結合標記蛋白分子的性質13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標記物，已將蛋白質的檢測范圍擴展至低飛摩爾水平；更近使用該技術的一篇報道展示了檢測到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達到的靈敏度然而，檢測蛋白質仍然落后于核酸，如聚合酶鏈反應（PCR），從而限制了蛋白質組中具有已在血液中檢測到6,19。單個蛋白質分子的分離和檢測為測量極低濃度的蛋白質s1,2提供了一種有希望的方法。 芯棄疾JX-8B簡易版單分子ELISA檢測產品，極速檢測，檢測步驟只需要3次操作，遠遠快于常規ELISA；

創新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數字ELISA

我公司推出的數字化高靈敏ELISA芯片檢測產品應用場景：適合生物實驗室、醫學實驗室、科研市場、產品預研、產品開發、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應用場景應用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測產品。

用DNA捕獲探針(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA）功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的說明制備的。這些珠子與生物素化互補DNA的1μM（5’-生物素-CTCT）孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE緩沖液中過夜(16h）孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后，用PBS洗滌珠子三次含0.1%Tween-20的緩沖液。將珠子樣品分裝至微孔板中100μL中每孔給予400,000個微球。從微孔板孔中吸取緩沖液，將微球重懸后與不同濃度的ofSβG孵育。 多指標檢測 POCT 芯片采用單分子捕獲技術，15-20 分鐘出結果，靈敏度達 pg/ml 級別。微型數字ELISA特點

芯棄疾芯片可檢測血清中 NfL 等較低豐度神經因子，助力阿爾茨海默癥早期篩查。單分子檢測數字ELISA穩定性

    神經退行性疾病的超早期診斷突破：單分子芯片通過檢測血清中**豐度生物標志物（如NfL濃度<1pg/mL、pTau181低至），可在阿爾茨海默癥（AD）臨床癥狀出現前16年發現病理異常。臨床研究顯示，AD患者血清NfL水平較健康對照組升高3-5倍（p<），且與腦脊液檢測結果高度相關（r=）。結合Aβ42/Aβ40比值（閾值<）與Tau蛋白磷酸化位點分析，芯片可精細區分AD、路易體癡呆及額顳葉癡呆，診斷特異性達92%。在藥物研發中，該技術用于追蹤抗Aβ單抗***的生物標志物動態變化（如Aβ42***率每月提升15%），為劑量調整與療效評估提供量化依據。此外，芯片支持腦脊液替代檢測，通過血清分析即可實現無創監測，患者依從性提升50%。 單分子檢測數字ELISA穩定性