吉林病理HE染色服務

來源: 發布時間:2025-06-02

HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項:多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸,使溶液pH降低,從而影響染色。不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。多聚甲醛雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過24小時。多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中,固定完成后用適當的洗滌液或水沖洗數小時仍會有殘留,因此后續實驗結果如果受醛基影響,須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續操作。HE染色試驗技術及注意事項。吉林病理HE染色服務

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HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法:1)二甲苯使用過久,含蠟成分太高或脫蠟效果差:可更換二甲苯驗證。2)切片經烤片,冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低;延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少,幅度太小;可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久,導致乙醇中二甲苯含量過高,二甲苯殘留在切片上(由于二甲苯與水不相溶,切片上有二甲苯的地方,蘇木精就沒有辦法滲透進去,在切片染色完成后留下了點狀的不著**域):更換各道乙醇驗證。5)二甲苯、乙醇質量不佳(偶有試劑瓶內裝的試劑與試劑名不相符):換批號驗證。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯:需重新配置驗證。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯:需重新配置驗證。8)烤片時間短,切片上水分沒有烤干,也會導致著色不勻,出現點狀發白區域。安徽專業的HE染色價格HE染色結果如何分析和讀片?

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HE染色反藍的原理:蘇木素染液,細胞核內的染色質主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結構中,兩條鏈上的磷酸基向外,帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。 分化:蘇木素染色之后,用水洗去未結合在細胞上的染液,但是在細胞核中結合過多的染料和細胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,才能保證細胞核和細胞漿染色的分明,把這個過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使色素與組織解離,分化不可過度。藍化:分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態,在堿性條件下處于藍色離子狀態,而呈藍色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木精染上的細胞核變呈藍色,稱藍化作用,一般多用自來水浸洗即可變藍,也可用溫水(50度溫水比較好)變藍。

HE染色堿染料染主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著色。學上常用的一種染色方法為蘇木精 伊紅染色法。蘇木精 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸顆粒呈強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白液體呈粉紅色。南京英瀚斯,專業的技術提供專業的HE染色服務。

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HE染色結果判讀:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細胞的種類有關,也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當其衰老時或發生退行性變則呈現嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現透明變性時,伊紅著色由淺變深。H-E染色評定標準:(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均勻,無皺褶無刀痕;(2)染色核漿分明,紅藍適度,透明潔凈,封裱美觀。專業的HE染色服務平臺,南京英瀚斯生物。河南比較好的HE染色服務

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HE染色是目前國內外病理診斷上***采用的常規染色方法。切片質量的好壞,可直接影響疾病診斷的及時與準確性。因此,能制作出一張高質量的HE染色切片,是必須掌握的技術之一。送檢樣本經4%多聚甲醛固定,固定狀態良好后,嚴格按照本單位病理實驗檢測SOP程序進行修剪、脫水、包埋、切片、染色、封片***鏡檢合格的樣片。在顯微鏡下瀏覽切片或瀏覽數字切片,在不同倍數下詳細觀察組織切片情況,對切片中基本病理改變如充血、淤血、出血、水腫、變性、壞死、增生、纖維化、機化、肉芽組織、炎性變化等情況文字描述,并反映出片子之間的差異。對典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標識。吉林病理HE染色服務

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