由膠體金標記技術發展起來的膠體金免疫快速診斷技術主要有兩種:快速斑點免疫金滲濾法和膠體金免疫層析法。后者,也就是膠體金檢測卡,具有操作簡便(浸入液體中就行)、快速(全程5~10分鐘搞定)、無需儀器設備(結果目測就OK)、試劑穩定、成品易于保存(保質期1~2年)等優點,是科學研究和臨床診斷的有力工具。適合于膠體金試紙條(卡)的膠體金粒徑在20~40nm之間為宜,制備的膠體金溶液呈紅色,膠體金被置于試紙條(卡)的樣品墊下游。當液體樣品滴加后,液體溶解膠體金并帶動其與樣品中的抗原(抗體),在硝酸纖維素膜的毛細作用下從一端慢慢滲移到吸收墊一端,利用抗體/抗原特異性結合及膠休金的顯色(紅色)反應,可以檢測抗原/抗體存在與否。食品安全快速檢測的基本原則有哪些?廣州萊克多巴胺的膠體金檢測卡
膠體金具有很高的動力學穩定性,在穩定因素不受破壞時自身凝聚極慢,可放置數年不發生凝聚。影響穩定的因素主要有電解質、溶膠濃度、溫度、非電解質等。金溶膠必須有少量電解質作穩定劑,但濃度不宜過高。高濃度親水性非電解質能剝去膠粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物質促使溶膠凝聚,但一定量的高分子物質反而可增加溶膠穩定性,如蛋白質、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的穩定效果。膠體金在弱堿環境下帶負電荷,可與蛋白質分子的正電荷基團形成牢固的結合,由于這種結合是靜電結合,所以不影響蛋白質的生物特性。膠體金除了與蛋白質結合以外,還可以與許多其它生物大分子結合,如SPA、PHA、ConA等。長春五氯酚鈉膠體金檢測卡膠體金是免疫分析中很好的標記物。
食品快速檢測的主要方法有哪些?(1)試紙法:用試紙直接顯色來定性,根據顯色深來定量。(2)試紙色譜法:用試紙層析顯色定性來作為限量指如蘇丹紅、瘦肉精。(3)比色管比色法:與試劑反應后觀察比色管顏色來定根據顏色深淺來半定量,如亞硝酸鹽、甲醇、二氧化硫等,比色定量可以是目視,也可以用便攜式光度計。(4)滴定法:用裝有標準溶液的滴瓶滴定樣品,根據消耗的滴數來判定被檢物質的含量,如酸堿、氧化還原性物質等。(5)膠體金檢測卡法:用試紙層析后膠體金顯色來定性。(6)酶聯免疫吸附測定(ELISA)試劑盒法:抗原抗體之間發生特異結合反應,根據顯色深淺來定量分析。(7)便攜式儀器法:如便攜式甲醇速測儀、食品安全檢測儀(分光光度計)、ATP熒光檢測儀、酸度計、肉類水分測定儀、電導儀、溫濕度計、中心溫度計、食用油極性測定儀、輻照度計等。(8)其他一些形式的快速檢測方法。
農藥殘留快速檢測卡對農藥非常敏感,附近有農藥噴灑或使用衛生殺蟲劑,以及操作者手上或器具上沾有微量農藥,都會造成對照與檢測卡片變色出現誤差。當溫度低于37℃,酶反應的速度隨之放慢,藥品加液后放置反應的時間應相對延長,延長時間的缺點,應以空白對照卡用手指(體溫)捏3min時間可以變藍,即可往下操作(注:若檢測量大,可配置恒溫水箱或使用用農藥殘留快速檢測儀)。注意樣品放置的時間應與空白對照卡放置的時間一致才有可比性。空白對照卡不變色的原因 :一是藥片表面緩沖液加的少,預反應后的藥片表面不夠濕潤,二是溫度太低,需進行適當的保溫。瘦肉精快速檢測卡是采用免疫競爭法分析原理結合膠體金標記技術設計的一種快速檢測試劑。
膠體金是一種常用的免疫標記技術,是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種免疫層析技術。試紙條含有被事先固定于膜上測試區的特異性合成抗原(包被抗原),結合墊上含有標記的抗特定品的特異性單克隆抗體;測試時,樣本滴入檢測孔內,樣本隨之在毛細效應下向上層析。如樣本中的品濃度低于閾值或者沒有待測毒時,膠體金標記的特異性抗體不能被樣本中的品全部結合。金標免疫層析技術快速、簡便、穩定性好,有效期可長達2-3年。目前已應用于病毒、細菌及各種蛋白質的檢測,常見的毒快檢產品包括尿液檢測卡、唾液檢測卡等,檢測時間只需5-10分鐘,這促進了該方法的普及應用。食品快速檢測儀主要有哪些?中國香港甲萘威膠體金檢測卡
膠體金因而具有膠體的多種特性,特別是對電解質的敏感性。廣州萊克多巴胺的膠體金檢測卡
膠體金檢測常用檢測技術快速金標試劑技術:是將特異的抗體先固定于酸類纖維素膜的某一區帶,當該干燥的酸類纖維素一端浸入樣品(尿液或血清)后,由于毛細管作用,樣品將沿著該膜向前移動,當移動至固定有抗體的區域時,樣品中相應的抗原即與該抗體發生特異性結合。同時利用金粒具有高電子密度的特性,在金標蛋白結合處。當這些標記物在相應的配體處大量聚集時,肉眼可見紅色的斑點。膠體金檢測卡為了食品安全,相關部門可以通過瘦肉精檢測卡來確定是否含有瘦肉精。廣州萊克多巴胺的膠體金檢測卡
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